Mine otse sisu juurde
HMEC-1
Kude
Nahk
Sünonüümid
Hmec-1, HMEC1, CDC/EU.HMEC-1, Human Microvascular Endothelial Cell line-1

Dokumendid

HMEC-1

Cell line · Toote number 304064

HMEC-1 cells, or Human Microvascular Endothelial Cells-1, are an immortalized cell line derived from human dermal microvascular endothelial cells. This ce...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HMEC-1 rakud ehk inimese mikrovaskulaarsed endoteelirakud-1 on immortaliseeritud rakuliin, mis on saadud inimese naha mikrovaskulaarsetest endoteelirakkudest. See rakuliin töötati välja mikrovaskulaarsete endoteelide funktsiooni ja patoloogia uurimise hõlbustamiseks. HMEC-1 rakke kasutatakse laialdaselt vaskulaarbioloogia uuringutes tänu nende võimele säilitada paljud primaarsete endoteelirakkude fenotüübilised ja funktsionaalsed omadused.

HMEC-1 rakkudel on tüüpilised endoteelirakkude markerid, nagu CD31 (PECAM-1), von Willebrandi faktor ja VE-kadheriin, ning nad suudavad sobival maatriksil kasvatades moodustada kapillaarilaadseid struktuure, mis imiteerivad angiogeneesi in vitro. See muudab nad eriti väärtuslikuks angiogeneesi (uute veresoonte moodustumine olemasolevatest veresoontest) uurimisel, mis on kriitiline protsess nii füsioloogilistes kui ka patoloogilistes seisundites, nagu haavade paranemine, vähkkasv ja südame-veresoonkonna haigused.

Neid rakke kasutatakse ka endoteelirakkude vastuste uurimiseks põletikulistele tsütokiinidele, endoteelikihtide barjäärifunktsiooni ning endoteelirakkude ja teiste rakutüüpide, näiteks immuunsüsteemi rakkude vaheliste vastastikmõjude uurimiseks. HMEC-1 rakke saab geneetiliselt manipuleerida, mis võimaldab teadlastel uurida konkreetsete geenide mõju endoteeli funktsioonile ja modelleerida erinevaid veresoonkonna haigusi.

Lisaks on HMEC-1 rakud mudeliks endoteeli barjääri läbilaskvuse uurimiseks, mis on oluline ravimite manustamise ja nakkushaiguste patogeneesi kontekstis, kus patogeenid ületavad endoteeli barjääre. Rakuliini mitmekülgsus ja kasutusmugavus muudavad selle jätkuvalt mikrovaskulaarsete endoteelirakkude bioloogia ja patoloogia uuringute nurgakiviks.

Kude
Nahk
Rakendused
Inimese naha endoteelirakkude uuringud
Sünonüümid
  • Hmec-1
  • HMEC1
  • CDC/EU.HMEC-1
  • Human Microvascular Endothelial Cell line-1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (HMEC-1) contains an SV40 T-Antigen construct delivered via the pSVT vector, enabling robust proliferation and immortalization. The construct is stably integrated into endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Endoteelilaadsed

04Tunnused

Viide
HMEC-1 (Cytioni katalooginumber 304064)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0307

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Von Willebrandi faktor (vWF), raku adhesioonimolekulid ICAM-1
Viirused
Simian virus 40 (suur T-antigeen)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w/o: Ribonukleosiidid, w/o: Deoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Keskkonda täiendatakse 10% FBS, 10 ng/ml epidermaalse kasvufaktori, 1 mikrogramm/ml hüdrokortisooni, 10 mM glutamiini abil
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
1 kuu