Gå direkte til indholdet
HMEC-1
Væv
Hud
Synonymer
Hmec-1, HMEC1, CDC/EU.HMEC-1, Human Microvascular Endothelial Cell line-1

Dokumenter

HMEC-1

Cell line · Varenummer 304064

HMEC-1 cells, or Human Microvascular Endothelial Cells-1, are an immortalized cell line derived from human dermal microvascular endothelial cells. This ce...

€650.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HMEC-1-celler, eller Human Microvascular Endothelial Cells-1, er en udødeliggjort cellelinje, der stammer fra humane dermale mikrovaskulære endotelceller. Denne cellelinje blev udviklet for at lette forskningen i mikrovaskulær endotelfunktion og -patologi. HMEC-1-celler bruges i vid udstrækning i vaskulærbiologisk forskning på grund af deres evne til at bevare mange af de primære endotelcellers fænotypiske og funktionelle egenskaber.

HMEC-1-celler viser typiske endotelcellemarkører som CD31 (PECAM-1), von Willebrand-faktor og VE-cadherin, og de kan danne kapillærlignende strukturer, når de dyrkes på passende matricer, der efterligner angiogenese in vitro. Det gør dem særligt værdifulde til undersøgelser af angiogenese, dannelsen af nye blodkar fra eksisterende vaskulatur, en kritisk proces under både fysiologiske og patologiske forhold som f.eks. sårheling, kræftvækst og hjerte-kar-sygdomme.

Disse celler bruges også til at udforske endotelcellers reaktion på inflammatoriske cytokiner, endotellagets barrierefunktion og samspillet mellem endotelceller og andre celletyper som f.eks. immunceller. HMEC-1-celler kan manipuleres genetisk, hvilket gør det muligt for forskere at undersøge specifikke geners indvirkning på endotelfunktionen og at modellere forskellige vaskulære sygdomme.

Desuden fungerer HMEC-1-celler som et modelsystem til undersøgelse af permeabiliteten af endotelbarrierer, hvilket er afgørende i forbindelse med levering af lægemidler og patogenesen af infektionssygdomme, hvor patogener krydser endotelbarrierer. Cellelinjens alsidighed og brugervenlighed gør den fortsat til en hjørnesten i undersøgelser af mikrovaskulær endotelcellebiologi og -patologi.

Væv
Hud
Anvendelser
Forskningsstudier for humane dermale endotelceller
Synonymer
  • Hmec-1
  • HMEC1
  • CDC/EU.HMEC-1
  • Human Microvascular Endothelial Cell line-1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (HMEC-1) contains an SV40 T-Antigen construct delivered via the pSVT vector, enabling robust proliferation and immortalization. The construct is stably integrated into endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Endotel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HMEC-1 (Cytion katalognummer 304064)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0307

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Von Willebrands faktor (vWF), celleadhæsionsmolekyler ICAM-1
Vira
Simian virus 40 (stort T-antigen)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Alpha MEM, m: 2,0 mM stabil glutamin, uden: Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 10 ng/mL epidermal vækstfaktor, 1 mikrogram/mL hydrokortison, 10 mM glutamin
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
1 måned