Przejdź do treści
Komórki K562
Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa
Synonimy
K562, K.562, K 562, KO, GM05372, GM05372E

Dokumenty

Komórki K562

Cell line · Numer produktu 300224

Linia komórkowa K562, pochodząca ze szpiku kostnego 53-letniej kobiety cierpiącej na przewlekłą białaczkę szpikową, stanowi podstawę różnych badań...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa K562, pochodząca ze szpiku kostnego 53-letniej kobiety z przewlekłą białaczką szpikową, służy jako kamień węgielny w różnych dziedzinach badań, takich jak immunologia, immunologia nowotworów i badania nad zaburzeniami układu odpornościowego. Ludzkie komórki K-562 są szeroko stosowane w badaniach obejmujących interakcje układu odpornościowego, w szczególności z komórkami efektorowymi, takimi jak komórki NK. Wynika to z ich unikalnych cech, takich jak ekspresja specyficznych antygenów, które mogą być rozpoznawane przez komórki NK.

Badanie interakcji między komórkami NK a nowotworowymi liniami komórkowymi, takimi jak K562, oferuje wgląd w mechanizmy obrony immunologicznej. Zdolność komórek NK do rozpoznawania i reagowania na komórki K562 różni się w zależności od obecności określonych markerów, które zmieniają się w trakcie cyklu komórkowego K562.

Komórki K562 charakteryzują się obecnością chromosomu Philadelphia, który wynika z translokacji między chromosomami 9 i 22, tworząc gen fuzyjny BCR-ABL. Ten gen fuzyjny nie jest normalnym transkryptem ABL, ale zmutowaną formą, która jest konstytutywnie aktywna i prowadzi do niekontrolowanej proliferacji komórek. Analiza transkryptów ABL w komórkach K562 rzuca światło na dynamikę molekularną białaczki i strategie unikania odporności.

Komórki K562 mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia cyklu komórkowego, w szczególności dla analizy faz i dystrybucji cyklu komórkowego. Analiza ta jest niezbędna do oceny wpływu ekspresji genu ABL i związanego z tym spadku transkryptów fuzyjnych ABL. Ponadto komórki K562 są cenne w testach oceniających cytotoksyczne działanie inhibitorów FGFR i aktywność enzymów epigenetycznych, podkreślając ich znaczenie w wyjaśnianiu szlaków sygnalizacji komórkowej i mechanizmów działania różnych środków terapeutycznych.

Wszechstronność komórek K562, począwszy od ich roli w testach aktywności enzymatycznej do ich zastosowania w badaniach immunologicznych z komórkami natural killer (NK), podkreśla ich szeroką użyteczność w sferze naukowej. Ta zdolność adaptacji podkreśla ich znaczenie w wypełnianiu luki między badaniami podstawowymi a medycyną translacyjną, odgrywając kluczową rolę w walce z przewlekłą białaczką szpikową.

Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa
Synonimy
  • K562
  • K.562
  • K 562
  • KO
  • GM05372
  • GM05372E

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki
Typ komórki
Limfoblast
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy.

04Identyfikatory

Źródło
K562 (numer katalogowy Cytion 300224)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0004

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
CD7 (25%)
Izoenzymy
G6PD, B, AK-1, 1, ES-D, 1, GLO-1, 2, PGM1, 0, PGM3, 1, Me-2, 0
Onkogeny
BCR-ABL1
Transkryptaza odwrotna
Negatywny

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Kultury należy utrzymywać poprzez okresowe dodawanie lub wymianę pożywki. Kultury należy rozpocząć od gęstości 5 x 105 komórek/ml i utrzymywać stężenie komórek w zakresie od 3 x 105 do 1 x 106 komórek/ml, aby zapewnić optymalny wzrost.
Gęstość wysiewu
3 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 2 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy pozostawić komórki do regeneracji na około 24 do 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
53 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski