Přejít na obsah
Buňky K562
Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie
Synonyma
K562, K.562, K 562, KO, GM05372, GM05372E

Dokumenty

Buňky K562

Cell line · Číslo výrobku 300224

Buněčná linie K562, pocházející z kostní dřeně 53leté ženy s chronickou myeloidní leukémií, představuje základní kámen v různých výzkumech...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie K562, pocházející z kostní dřeně 53leté ženy s chronickou myelogenní leukémií, slouží jako základní kámen v různých oblastech výzkumu, jako je imunologie, nádorová imunologie a výzkum poruch imunitního systému. Lidské buňky K-562 jsou široce využívány ve studiích zahrnujících interakce imunitního systému, zejména s efektorovými buňkami, jako jsou přirozené zabíječské buňky (NK). Důvodem jsou jejich jedinečné vlastnosti, jako je exprese specifických antigenů, které mohou být rozpoznány buňkami NK.

Zkoumání interakce mezi NK buňkami a nádorovými buněčnými liniemi, jako je K562, nabízí pohled na mechanismy imunitní obrany. Schopnost NK buněk rozpoznat buňky K562 a reagovat na ně se liší v závislosti na přítomnosti specifických markerů, které se mění v průběhu buněčného cyklu K562.

Buňky K562 se vyznačují přítomností filadelfského chromozomu, který vzniká translokací mezi chromozomy 9 a 22 a vytváří fúzní gen BCR-ABL. Tento fúzní gen není normálním transkriptem ABL, ale jeho mutovanou formou, která je konstitutivně aktivní a vede k nekontrolované proliferaci buněk. Analýza transkriptů ABL v buňkách K562 vrhá světlo na molekulární dynamiku leukémie a strategie vyhýbání se imunitnímu systému.

Buňky K562 mají zásadní význam pro pochopení buněčného cyklu, zejména pro analýzu fází a distribuce buněčného cyklu. Tato analýza je nezbytná pro vyhodnocení vlivu exprese genu ABL a s tím spojeného poklesu fúzních transkriptů ABL. Kromě toho jsou buňky K562 cenné při testech hodnotících cytotoxické účinky inhibitorů FGFR a aktivitu epigenetických enzymů, což zdůrazňuje jejich význam při objasňování buněčných signálních drah a mechanismů účinku různých terapeutických látek.

Všestrannost buněk K562, od jejich úlohy v testech enzymové aktivity až po jejich použití v imunologických studiích s buňkami přirozených zabíječů (NK), zdůrazňuje jejich širokou využitelnost ve vědecké sféře. Tato přizpůsobivost podtrhuje jejich význam při překlenování propasti mezi základním výzkumem a translační medicínou, což hraje klíčovou roli v pokroku v boji proti chronické myelogenní leukemii.

Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie
Synonyma
  • K562
  • K.562
  • K 562
  • KO
  • GM05372
  • GM05372E

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky
Typ buňky
Lymfoblasty
Tumorogenní
Ano, na nahých myších.

04Identifikátory

Citace
K562 (katalogové číslo Cytion 300224)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0004

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
CD7 (25 %)
Isoenzymy
G6PD, B, AK-1, 1, ES-D, 1, GLO-1, 2, PGM1, 0, PGM3, 1, Me-2, 0
Onkogeny
BCR-ABL1
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
3 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
Každé 2 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení nechte buňky zhruba 24 až 48 hodin zotavit.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
53 let
Etnická příslušnost
Kavkazský