Mine otse sisu juurde
K562 rakud
Kude
Luuüdi
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia
Sünonüümid
K562, K.562, K 562, KO, GM05372, GM05372E

Dokumendid

K562 rakud

Cell line · Toote number 300224

K562 rakuliin, mis pärineb 53-aastase kroonilise müelogeense leukeemiaga naise luuüdist, on mitmesuguste uuringute nurgakiviks...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

K562 rakuliin, mis pärineb 53-aastase kroonilist müelogeenset leukeemiat põdeva naise luuüdist, on nurgakiviks erinevates uurimisvaldkondades, nagu immunoloogia, kasvajate immunoloogia ja immuunsüsteemi häirete uurimine. Inimese K-562 rakke kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis hõlmavad immuunsüsteemi koostoimet, eriti efektorrakkudega, nagu loomulikud tapjarakud (NK). Selle põhjuseks on nende ainulaadsed omadused, näiteks NK-rakkude poolt äratuntavate spetsiifiliste antigeenide ekspressioon.

NK-rakkude ja vähirakuliinide, nagu K562, vahelise koostoime uurimine annab ülevaate immuunsüsteemi kaitsemehhanismidest. NK-rakkude võime K562 rakke ära tunda ja neile reageerida sõltub konkreetsete markerite olemasolust, mis kõikuvad kogu K562 rakutsükli jooksul.

K562 rakke iseloomustab Philadelphia kromosoomi olemasolu, mis tuleneb kromosoomide 9 ja 22 vahelisest translokatsioonist, mis tekitab BCR-ABL fusioonigeeni. See fusioonigeen ei ole normaalne ABL-transkript, vaid mutatsioonivorm, mis on konstitutiivselt aktiivne ja põhjustab rakkude kontrollimatut proliferatsiooni. ABL-i transkripti analüüsimine K562 rakkudes heidab valgust leukeemia molekulaarse dünaamika ja immuunsüsteemi vältimise strateegiate kohta.

K562 rakud on olulised rakutsükli mõistmiseks, eelkõige rakutsükli faaside ja jaotuste analüüsimiseks. See analüüs on oluline ABL-geeni ekspressiooni mõju hindamiseks ja sellega seotud ABL-fusiooni transkriptide vähenemise hindamiseks. Lisaks on K562 rakud väärtuslikud katsetes, millega hinnatakse FGFR inhibiitorite tsütotoksilist mõju ja epigeneetiliste ensüümide aktiivsust, rõhutades nende tähtsust raku signaaliradade ja erinevate raviainete toimemehhanismide selgitamisel.

K562 rakkude mitmekülgsus, alates nende rollist ensüümide aktiivsuse analüüsides kuni nende kasutamiseni immunoloogilistes uuringutes looduslike tapjarakkudega (NK), rõhutab nende laialdast kasutatavust teaduses. Selline kohanemisvõime rõhutab nende tähtsust alusuuringute ja translatiivse meditsiini vahelise lõhe ületamisel, mis mängib olulist rolli võitluses kroonilise müelogeense leukeemia vastu.

Kude
Luuüdi
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia
Sünonüümid
  • K562
  • K.562
  • K 562
  • KO
  • GM05372
  • GM05372E

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
Lümfoblastid
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.

04Tunnused

Viide
K562 (Cytioni katalooginumber 300224)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0004

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CD7 (25%)
Isoensüümid
G6PD, B, AK-1, 1, ES-D, 1, GLO-1, 2, PGM1, 0, PGM3, 1, Me-2, 0
Onkogeenid
BCR-ABL1
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
3 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 2 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Palun laske rakkudel pärast sulatamist taastuda umbes 24-48 tundi.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia