Siirry sisältöön
K562-solut
Kudos
Luuydin
Sairaus
Krooninen myelooinen leukemia
Synonyymit
K562, K.562, K 562, KO, GM05372, GM05372E

Asiakirjat

K562-solut

Cell line · Tuotenumero 300224

K562-solulinja, joka on peräisin 53-vuotiaan kroonista myelooista leukemiaa sairastavan naisen luuytimestä, on keskeinen osa monia tutkimuksia...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

K562-solulinja, joka on peräisin 53-vuotiaan kroonista myelogeenistä leukemiaa sairastavan naisen luuytimestä, toimii kulmakivenä monilla tutkimusaloilla, kuten immunologiassa, kasvainten immunologiassa ja immuunijärjestelmän häiriöiden tutkimuksessa. Ihmisen K-562-soluja käytetään laajalti tutkimuksissa, jotka koskevat immuunijärjestelmän vuorovaikutusta erityisesti efektorisolujen, kuten luonnollisten tappajasolujen (NK) kanssa. Tämä johtuu niiden ainutlaatuisista ominaisuuksista, kuten NK-solujen tunnistamien spesifisten antigeenien ilmentymisestä.

NK-solujen ja syöpäsolulinjojen, kuten K562:n, välisen vuorovaikutuksen tutkiminen tarjoaa tietoa immuunipuolustusmekanismeista. NK-solujen kyky tunnistaa K562-solut ja reagoida niihin vaihtelee tiettyjen merkkiaineiden läsnäolon mukaan, jotka vaihtelevat K562-solusyklin aikana.

K562-soluille on ominaista Philadelphia-kromosomin esiintyminen, joka johtuu kromosomien 9 ja 22 välisestä translokaatiosta, joka synnyttää BCR-ABL-fuusiogeenin. Tämä fuusiogeeni ei ole normaali ABL-transkriptio vaan mutaatio, joka on konstitutiivisesti aktiivinen ja johtaa hallitsemattomaan solujen lisääntymiseen. ABL-transkriptien analysointi K562-soluissa valottaa leukemian molekyylidynamiikkaa ja immuunijärjestelmän kiertämisstrategioita.

K562-solut ovat ratkaisevan tärkeitä solusyklin ymmärtämisessä, erityisesti solusyklin vaiheiden ja jakaumien analysoinnissa. Tämä analyysi on olennainen ABL-geenin ilmentymisen vaikutuksen ja siihen liittyvän ABL-fuusiotranskriptien vähenemisen arvioimiseksi. Lisäksi K562-solut ovat arvokkaita kokeissa, joissa arvioidaan FGFR:n estäjien sytotoksisia vaikutuksia ja epigeneettisten entsyymien aktiivisuutta, mikä korostaa niiden merkitystä solujen signaalireittien ja eri terapeuttisten aineiden vaikutusmekanismien selvittämisessä.

K562-solujen monipuolisuus, joka ulottuu niiden roolista entsyymiaktiivisuusmäärityksissä aina niiden soveltamiseen immunologisissa tutkimuksissa luonnollisilla tappajasoluilla (NK-soluilla), korostaa niiden laajaa käyttökelpoisuutta tieteen alalla. Tämä sopeutumiskyky korostaa niiden merkitystä perustutkimuksen ja translationaalisen lääketieteen välisen kuilun kuromisessa umpeen, ja niillä on ratkaiseva merkitys kroonisen myelogeenisen leukemian torjunnan edistämisessä.

Kudos
Luuydin
Sairaus
Krooninen myelooinen leukemia
Synonyymit
  • K562
  • K.562
  • K 562
  • KO
  • GM05372
  • GM05372E

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot
Solutyyppi
Lymfoblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä.

04Tunnisteet

Lähdeviite
K562 (Cytionin luettelonumero 300224)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0004

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
CD7 (25 %)
Isoentsyymit
G6PD, B, AK-1, 1, ES-D, 1, GLO-1, 2, PGM1, 0, PGM3, 1, Me-2, 0
Onkogeenit
BCR-ABL1
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
3 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua noin 24-48 tuntia sulatuksen jälkeen.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
53 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen