Przejdź do treści
B-LCL-HROG17
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Linia komórek limfoblastoidalnych typu B poddanych transformacji wirusem EBV (B-LCL); dawca z rakiem żołądka

Dokumenty

B-LCL-HROG17

Cell line · Numer produktu 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis

B-LCL-HROG17 to ludzka linia komórek limfoblastoidalnych typu B (B-LCL) transformowana wirusem Epsteina-Barra (EBV), pochodząca z krwi obwodowej 70-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej cierpiącego na raka żołądka, należąca do serii biobanku HROG. Transformacja in vitro pierwotnych limfocytów B krwi obwodowej wirusem EBV doprowadziła do powstania stabilnie nieśmiertelnej linii komórkowej rosnącej w zawiesinie. Komórki HROG17 wykazują morfologię podobną do limfoblastów i konstytutywnie wyrażają białka latencji wirusa EBV oraz wysoki poziom cząsteczek HLA klasy I i II, cząsteczek kostymulujących CD80 i CD86, cząsteczek adhezyjnych CD54 i CD58, a także antygenów powierzchniowych komórek B: CD19, CD20 oraz CD23, co świadczy o silnej funkcji komórek prezentujących antygen.

Linia B-LCL-HROG17 jest wykorzystywana w testach z komórkami T i komórkami NK, typowaniu HLA, reakcjach mieszanych limfocytów, badaniach prezentacji antygenów oraz protokołach dotyczących limfocytów T cytotoksycznych (CTL). Jako część biobanku HROG dopasowanego do pacjentów stanowi ona zdefiniowany punkt odniesienia immunologicznego dla badań immunologicznych nad rakiem żołądka. Kontekst 70-letniego dawcy płci męskiej jest odpowiedni do badań funkcji immunologicznej związanych z wiekiem w kontekście raka żołądka, w tym do analiz reaktywności komórek T oraz wydajności komórek prezentujących antygen (APC) u starszych pacjentów płci męskiej.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Linia komórek limfoblastoidalnych typu B poddanych transformacji wirusem EBV (B-LCL); dawca z rakiem żołądka
Zastosowania
Badania z zakresu immunologii; testy komórek T i komórek NK; typowanie HLA; badania nad prezentacją antygenów; reakcje mieszanych limfocytów; komórki docelowe w testach CTL; immunologia raka żołądka

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Status GMO
GMO-S2
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobne do limfoblastów
Typ komórki
Limfoblast B
Czas podwojenia
24 do 48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
B-LCL-HROG17 (numer katalogowy Cytion 302112)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: EBV

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki należy dodać 15–20% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Co 2–3 dni rozcieńczać hodowlę do stężenia 2–5 × 10⁵ komórek/ml świeżą, wstępnie podgrzaną pożywką kompletną. Przed przesadzeniem należy policzyć żywe komórki, aby utrzymać optymalne zagęszczenie. Nie należy dopuścić do przekroczenia gęstości hodowli wynoszącej 2 × 10⁶ komórek/ml. W razie potrzeby do wymiany pożywki można zastosować wirowanie (300 × g, 5 min). Nie jest wymagana dysocjacja enzymatyczna.
Współczynnik podziału
od 1 do 4
Gęstość wysiewu
od 2 do 5 × 10⁵ komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
70 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski