Prejsť na obsah
B-LCL-HROG17
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
B-lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom EBV (B-LCL); darca s rakovinou žalúdka

Dokumenty

B-LCL-HROG17

Cell line · Číslo výrobku 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

B-LCL-HROG17 je ľudská B-lymfoblastoidná bunková línia (B-LCL) transformovaná vírusom Epstein-Barrového (EBV), získaná z periférnej krvi 70-ročného pacienta kaukazského pôvodu s rakovinou žalúdka v rámci série biobanky HROG. In vitro transformácia primárnych B-lymfocytov z periférnej krvi vírusom EBV viedla k vytvoreniu stabilne imortalizovanej bunkovej línie rastúcej v suspenzii. Bunky HROG17 vykazujú morfológiu podobnú lymfoblastom a konštitutívne exprimujú proteíny EBV v latencii a vysokú hladinu HLA triedy I a II, kostimulačné molekuly CD80 a CD86, adhézne molekuly CD54 a CD58 a povrchové antigény B-buniek CD19, CD20 a CD23, čo podporuje silnú funkciu buniek prezentujúcich antigén.

B-LCL-HROG17 sa používa v testoch T-buniek a NK-buniek, pri typizácii HLA, v reakciách zmiešaných lymfocytov, v štúdiách prezentácie antigénov a v protokoloch CTL. Ako súčasť biobanky HROG zhodnej s pacientom poskytuje definovaný imunologický referenčný materiál pre imunologický výskum rakoviny žalúdka. Kontext 70-ročného mužského darcu je vhodný pre štúdie imunitnej funkcie súvisiacej s vekom v kontexte rakoviny žalúdka, vrátane analýz reaktivity T-buniek a účinnosti APC u starších mužských pacientov.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
B-lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom EBV (B-LCL); darca s rakovinou žalúdka
Aplikácie
Imunologický výskum; testy T-buniek a NK-buniek; typizácia HLA; štúdie prezentácie antigénov; reakcie zmiešaných lymfocytov; cieľové bunky pre testy CTL; imunológia rakoviny žalúdka

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobenia
24 až 48 hodín

04Identifikátory

Citácia
B-LCL-HROG17 (katalógové číslo Cytion 302112)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Transformant: EBV

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Do živného média pridajte 15–20 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Každé 2–3 dni zrieďte kultúru na koncentráciu 2–5 × 10⁵ buniek/ml čerstvým, vopred zahriatym kompletným médiom. Pred pasážovaním spočítajte životaschopné bunky, aby ste zachovali optimálnu hustotu. Nedovoľte, aby hustota kultúr presiahla 2 × 10⁶ buniek/ml. V prípade potreby je možné na výmenu média použiť centrifugáciu (300 × g, 5 min). Enzymatická disociácia nie je potrebná.
Pomer rozdelenia
1 až 4
Hustota výsevu
2 až 5 × 10⁵ buniek/ml
Obnova kvapaliny
Každé 2 až 3 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
70 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský