Gå til innholdet
B-LCL-HROG17
Vev
Perifert blod
Sykdom
EBV-transformert B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med magesvulst

Dokumenter

B-LCL-HROG17

Cell line · Produktnummer 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

B-LCL-HROG17 er en B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL) hos mennesker som er transformert av Epstein-Barr-viruset (EBV), og som stammer fra perifert blod fra en 70 år gammel kaukasisk mannlig pasient med magekreft i HROG-biobankserien. In vitro EBV-transformasjon av primære B-lymfocytter fra perifert blod resulterte i en stabilt immortalisert, suspensjonsvoksende cellelinje. HROG17-celler viser lymfoblastlignende morfologi og uttrykker konstant EBV-latensproteiner samt høye nivåer av HLA klasse I og II, kostimulerende molekyler CD80 og CD86, adhesjonsmolekyler CD54 og CD58, samt B-celleoverflateantigener CD19, CD20 og CD23, noe som understøtter en kraftig antigenpresenterende cellefunksjon.

B-LCL-HROG17 benyttes i T-celle- og NK-celleanalyser, HLA-typing, blandede lymfocyttreaksjoner, studier av antigenpresentasjon og CTL-protokoller. Som en del av den pasienttilpassede HROG-biobanken utgjør den en definert immunologisk referanse for immunologisk forskning på magekreft. Donoren, en 70 år gammel mann, er egnet for studier av aldersrelatert immunfunksjon i sammenheng med magekreft, inkludert analyser av T-celle-respons og APC-effektivitet hos eldre mannlige pasienter.

Vev
Perifert blod
Sykdom
EBV-transformert B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med magesvulst
Søknader
Immunologisk forskning; T-celle- og NK-celleanalyser; HLA-typing; studier av antigenpresentasjon; blandede lymfocyttreaksjoner; målceller for CTL-analyse; immunologi ved magekreft

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
GMO-status
GMO-S2
Detaljer om GMO-status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
B-lymfoblast
Fordoblingstid
24 til 48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-HROG17 (Cytion-katalognummer 302112)
NCBI-skattenummer
9606

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: EBV

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 15–20 % FBS i mediet
Subkultivering
Fortynn kulturen til 2–5 × 10⁵ celler/ml med ferskt, forvarmet komplett medium hver 2.–3. dag. Tell levedyktige celler før passering for å opprettholde optimal tetthet. La ikke kulturene overstige 2 × 10⁶ celler/ml. Sentrifugering (300 × g, 5 min) kan brukes til å skifte medium ved behov. Enzymatisk dissosiasjon er ikke nødvendig.
Oppdelingsforhold
1 til 4
Såtetthet
2 til 5 × 10⁵ celler/ml
Væskefornyelse
Hver 2. til 3. dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
70 år
Etnisitet
Kaukasisk