Gå direkte til indholdet
B-LCL-HROG17
Væv
Perifert blod
Sygdom
EBV-transformeret B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med mavekræft

Dokumenter

B-LCL-HROG17

Cell line · Varenummer 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

B-LCL-HROG17 er en human B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL), der er transformeret af Epstein-Barr-virus (EBV), og som stammer fra det perifere blod hos en 70-årig kaukasisk mandlig patient med mavekræft inden for HROG-biobankserien. In vitro EBV-transformation af primære B-lymfocytter fra perifert blod resulterede i en stabilt immortaliseret, suspensionsvoksende cellelinje. HROG17-celler udviser lymfoblastlignende morfologi og udtrykker konstant EBV-latensproteiner samt høje niveauer af HLA klasse I og II, de kostimulerende molekyler CD80 og CD86, adhæsionsmolekylerne CD54 og CD58 samt B-celleoverfladeantigenerne CD19, CD20 og CD23, hvilket understøtter en potent antigenpræsenterende cellefunktion.

B-LCL-HROG17 anvendes i T-celle- og NK-celleassays, HLA-typebestemmelse, blandede lymfocytreaktioner, undersøgelser af antigenpræsentation samt CTL-protokoller. Som en del af den HROG-patientmatchede biobank udgør den en defineret immunologisk reference for immunologisk forskning i mavekræft. Donoren, en 70-årig mand, er velegnet til undersøgelser af aldersrelateret immunfunktion i forbindelse med mavekræft, herunder analyser af T-celle-respons og APC-effektivitet hos ældre mandlige patienter.

Væv
Perifert blod
Sygdom
EBV-transformeret B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med mavekræft
Anvendelser
Immunologisk forskning; T-celle- og NK-celleanalyser; HLA-typebestemmelse; undersøgelser af antigenpræsentation; blandede lymfocytreaktioner; målceller til CTL-analyse; immunologi ved mavekræft

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
GMO-status
GMO-S2
Oplysninger om GMO-status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
B-lymfoblast
Fordoblingstid
24 til 48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-HROG17 (Cytion-katalognummer 302112)
NCBI-skattenummer
9606

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Transformant: EBV

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 15–20 % FBS til mediet
Oddyrkning
Fortynd kulturen til 2–5 × 10⁵ celler/ml med frisk, forvarmet komplet medium hver 2.–3. dag. Tæl de levedygtige celler inden passagering for at opretholde en optimal tæthed. Lad ikke kulturerne overstige 2 × 10⁶ celler/ml. Centrifugering (300 × g, 5 min) kan anvendes til at udskifte mediet, når det er nødvendigt. Der kræves ingen enzymatisk dissociation.
Opdelingsforhold
1 til 4
Såtæthed
2 til 5 × 10⁵ celler/ml
Væskeudskiftning
Hver 2. til 3. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
70 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk