Pāriet uz saturu
B-LCL-HROG17
Audums
Perifērās asinis
Slimība
EBV transformēta B limfoblastoīdu šūnu līnija (B-LCL); ar kuņģa vēzi saistīts donors

Dokumenti

B-LCL-HROG17

Cell line · Preces numurs 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

B-LCL-HROG17 ir cilvēka Epšteina-Barra vīrusa (EBV) transformēta B limfoblastoīdu šūnu līnija (B-LCL), kas iegūta no 70 gadus veca kaukāziešu izcelsmes vīrieša, kurš sirga ar kuņģa vēzi, perifērās asins parauga, kas iekļauts HROG biobankas sērijā. Primāro perifērās asins B limfocītu in vitro transformācija ar EBV radīja stabili imortalizētu, suspensijā augošu šūnu līniju. HROG17 šūnas uzrāda limfoblastveidīgu morfoloģiju un konstitutīvi ekspresē EBV latences proteīnus, kā arī augsta līmeņa HLA I un II klases antigēnus, kostimulējošās molekulas CD80 un CD86, adhezijas molekulas CD54 un CD58, kā arī B šūnu virsmas antigēnus CD19, CD20 un CD23, kas liecina par spēcīgu antigēnu prezentējošo šūnu funkciju.

B-LCL-HROG17 tiek izmantota T šūnu un NK šūnu testos, HLA tipizācijā, jaukto limfocītu reakcijās, antigēnu prezentācijas pētījumos un CTL protokolos. Kā daļa no HROG pacientam pielāgotās biobankas tā nodrošina definētu imunoloģisko atsauci kuņģa vēža imunoloģiskajiem pētījumiem. 70 gadus vecā vīrieša donora konteksts ir piemērots ar vecumu saistītas imūnfunkcijas pētījumiem saistībā ar kuņģa vēzi, tostarp T šūnu reaģētspējas un APC efektivitātes analīzēm vecākiem vīriešu pacientiem.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
EBV transformēta B limfoblastoīdu šūnu līnija (B-LCL); ar kuņģa vēzi saistīts donors
Pieteikumi
Imunoloģijas pētījumi; T šūnu un NK šūnu analīzes; HLA tipizācija; antigēnu prezentācijas pētījumi; jaukto limfocītu reakcijas; CTL analīzes mērķšūnas; kuņģa vēža imunoloģija

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
ĢMO statuss
GMO-S2
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs
Šūnu tips
B limfoblasts
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
B-LCL-HROG17 (Cytion kataloga numurs 302112)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: EBV

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Pievienojiet barotnei 15–20 % FBS
Pārstādīšana
Ik pēc 2–3 dienām kultūru atšķaidiet līdz 2–5 × 10⁵ šūnu/ml, izmantojot svaigu, iepriekš uzsildītu pilnvērtīgu barotni. Pirms pārstādīšanas saskaitiet dzīvotspējīgās šūnas, lai uzturētu optimālu blīvumu. Nedrīkst pieļaut, ka kultūru blīvums pārsniedz 2 × 10⁶ šūnu/ml. Vajadzības gadījumā barotnes nomaiņai var izmantot centrifugēšanu (300 × g, 5 min). Enzīmatiska disociācija nav nepieciešama.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 4
Sēšanas blīvums
2 līdz 5 × 10⁵ šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 2 līdz 3 dienām
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
70 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis