Přejít na obsah
B-LCL-HROG17
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
B-lymfoblastoidní buněčná linie transformovaná virem EBV (B-LCL); dárce s rakovinou žaludku

Dokumenty

B-LCL-HROG17

Cell line · Číslo výrobku 302112

B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

B-LCL-HROG17 je lidská B-lymfoblastoidní buněčná linie (B-LCL) transformovaná virem Epstein-Barr (EBV), odvozená z periferní krve 70letého muže kavkazského původu s rakovinou žaludku, která pochází ze série biobanky HROG. In vitro transformace primárních B-lymfocytů z periferní krve virem EBV vedla k vytvoření stabilně imortalizované buněčné linie rostoucí v suspenzi. Buňky HROG17 vykazují morfologii podobnou lymfoblastům a konstitutivně exprimují latentní proteiny EBV a vysokou hladinu HLA třídy I a II, kostimulační molekuly CD80 a CD86, adhezní molekuly CD54 a CD58 a povrchové antigeny B buněk CD19, CD20 a CD23, což podporuje silnou funkci buněk prezentujících antigen.

B-LCL-HROG17 se používá v testech T-buněk a NK-buněk, při typizaci HLA, ve smíšených lymfocytárních reakcích, ve studiích prezentace antigenů a v protokolech CTL. Jako součást biobanky HROG, která je přizpůsobena konkrétním pacientům, poskytuje definovaný imunologický referenční vzorek pro imunologický výzkum rakoviny žaludku. Kontext 70letého mužského dárce je vhodný pro studie imunitních funkcí souvisejících s věkem v kontextu rakoviny žaludku, včetně analýz reaktivity T buněk a účinnosti buněk prezentujících antigen u starších mužských pacientů.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
B-lymfoblastoidní buněčná linie transformovaná virem EBV (B-LCL); dárce s rakovinou žaludku
Aplikace
Imunologický výzkum; testy T-buněk a NK-buněk; typizace HLA; studie prezentace antigenů; reakce smíšených lymfocytů; cílové buňky pro testy CTL; imunologie rakoviny žaludku

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobení
24 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
B-LCL-HROG17 (katalogové číslo Cytion 302112)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: EBV

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 15–20 % FBS
Subkultivace
Každé 2–3 dny zřeďte kulturu na 2–5 × 10⁵ buněk/ml čerstvým, předem ohřátým kompletním médiem. Před pasážováním spočítejte životaschopné buňky, abyste udrželi optimální hustotu. Nenechte hustotu kultur překročit hodnotu 2 × 10⁶ buněk/ml. V případě potřeby lze k výměně média použít odstředění (300 × g, 5 min). Enzymatická disociace není nutná.
Poměr rozdělení
1 až 4
Hustota výsevu
2 až 5 × 10⁵ buněk/ml
Obnova tekutin
Každé 2 až 3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
70 let
Etnická příslušnost
Kavkazský