ETK-1

A ETK-1 é uma linha celular de colangiocarcinoma intra-hepático humano (IHCCA), originalmente isolada a partir do líquido ascítico de um doente adulto com colangiocarcinoma sarcomatóide. O tumor do qual a ETK-1 foi derivada apresentava componentes tanto de adenocarcinoma tubular como sarcomatóides, e a linha celular reflete o fenótipo sarcomatóide. As células ETK-1 crescem de forma aderente como uma monocamada epitelial uniforme com aspeto de paralelepípedo, composta principalmente por pequenas células poligonais com núcleos redondos a ovais e nucléolos proeminentes. As células em passagens iniciais apresentaram um tempo de duplicação da população de aproximadamente 70 horas e um cariótipo hiperdiplóide com um número modal de cromossomas na casa dos 70, consistente com a instabilidade cromossómica típica de neoplasias malignas agressivas do trato biliar.

Do ponto de vista imunofenotípico, as células ETK-1 expressam marcadores epiteliais biliares, incluindo γ-glutamil transpeptidase (GGT), citoqueratina 18 (CK18) e citoqueratina 19 (CK19), confirmando a sua origem colangiocítica. São negativas para marcadores associados aos hepatócitos, tais como a alfa-fetoproteína (AFP) e a albumina, em condições basais. As células ETK-1 expressam vimentina, refletindo as suas características sarcomatoides e o seu fenótipo mesenquimal parcial, ao mesmo tempo que não apresentam expressão do antígeno carcinoembrionário (CEA) nem do antígeno de hidrato de carbono 19-9 (CA19-9). Este perfil de marcadores corresponde à componente sarcomatoide observada no tumor primário e destaca características consistentes com propriedades semelhantes à transição epitelial-mesenquimal.

A ETK-1 também tem sido utilizada como modelo para estudar a plasticidade celular e a diferenciação de linhagens no colangiocarcinoma. O tratamento com o inibidor da metiltransferase de ADN, a 5-azacitidina, induziu alterações morfológicas e fenotípicas, resultando numa linha celular derivada com características semelhantes às dos hepatócitos, incluindo a expressão de AFP, albumina, integrina α1 e trombopoietina, juntamente com a perda de certos marcadores biliares. Em modelos de xenoenxertos, as células ETK-1 não tratadas formam tumores compatíveis com o adenocarcinoma tubular, apresentando um fenótipo ductal. Estes resultados demonstram que a ETK-1 mantém a plasticidade de diferenciação e constitui um valioso sistema in vitro para investigar a transdiferenciação epitelial biliar para hepatocítica, a regulação epigenética e a heterogeneidade tumoral no colangiocarcinoma intra-hepático.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia