Gå direkt till innehållet
HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP
Vävnad
Endocervix
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Primärtumörens lokalisation (endocervix)
Synonymer
HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP #272-78, HK CRISPR CAP-D2-mEGFP

HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP

Cell line · Produktnummer 301572

Cellinjen HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP är en genetiskt modifierad Hela Kyoto-cellinje. Dessa celler, som har modifierats med hjälp av CRISPR/Cas9-teknik, uttrycker CA...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Lågt lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP är en genetiskt modifierad Hela Kyoto-cellinje. Dessa celler har konstruerats med hjälp av CRISPR/Cas9-teknik och uttrycker CAP-D2-proteinet fusionerat med monomert Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP), vilket möjliggör visualisering av CAP-D2-dynamiken i realtid. Med mEGFP-markören kan forskarna studera proteinlokalisering, trafiktrafik och interaktioner inom cellerna.

De genetiska modifieringarna ger insikter i CAP-D2:s roll i cellulär signalering, cytoskeletal organisation och stressreaktioner. Dessutom förbättrar den fluorescerande markören avbildningen av levande celler och screening med hög kapacitet, vilket gör denna cellinje viktig för både grundforskning och tillämpad forskning.

Vävnad
Endocervix
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Primärtumörens lokalisation (endocervix)
Ansökningar
Biologi kring kondensin I-komplexet; avbildning av CAP-D2-subenheten; kondensins stökiometri; kromosomorganisation; cytoskelettets dynamik; avbildning av levande celler; high-content-screening; validering av CRISPR-knock-in
Synonymer
  • HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP #272-78
  • HK CRISPR CAP-D2-mEGFP

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP knock-in at the CAP-D2 locus for condensin-complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande celler med mosaikstensform
Celltyp
Epiteliala celler

04Identifierare

Källa
HK-2xCRISPR-CAP-D2-mEGFP (Cytion katalognummer 301572)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_UR42
Insättare
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttryck och mottaglighet

Produkter
EGFP (förstärkt grönt fluorescerande protein)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
30 år
Etnicitet
Afroamerikan