เซลล์ Hep3B: การวิจัยและการค้นพบมะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ

HEP3B เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งตับที่คงสภาพความเป็นเซลล์ต้นกำเนิดจากมนุษย์ ซึ่งถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยเกี่ยวกับพิษต่อตับและการเผาผลาญยา ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนในเซลล์ HEP3B มีสูงมาก ดังนั้นเซลล์เหล่านี้จึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการพัฒนา การลุกลาม และการรักษาโรคมะเร็งตับ บทความนี้ครอบคลุมข้อมูลที่จำเป็นทั้งหมดเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ HEP3B เพื่อช่วยให้คุณทำงานกับมันได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยหลักแล้วจะประกอบด้วย:

1. ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HEP3B
2. การเพาะเลี้ยงข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ HEP3B
3. เซลล์ไลน์ HEP3B: ข้อดีและข้อจำกัด
4. การประยุกต์ใช้เซลล์ HEP3B ในการวิจัย
5. สิ่งพิมพ์เกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ HEP3B
6. ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ HEP3B: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HEP3B

ข้อมูลหลักที่คุณต้องการเกี่ยวกับสายเซลล์คือแหล่งกำเนิดและลักษณะทั่วไปของมัน ข้อมูลนี้สามารถช่วยคุณตัดสินใจเกี่ยวกับการนำไปใช้ในงานวิจัยของคุณ และช่วยคุณในการจัดการกับมันได้ ส่วนของบทความนี้จะครอบคลุมข้อมูลที่จำเป็นทั้งหมดเกี่ยวกับแหล่งกำเนิดและลักษณะของ HEP3B ที่นี่คุณจะได้เรียนรู้: สายเซลล์ Hep 3B คืออะไร? ต้นกำเนิดของเซลล์ Hep3B คืออะไร? รูปร่างของเซลล์ HEP3B เป็นอย่างไร?

• HEP3B, สายเซลล์มะเร็งตับมนุษย์ชนิดต่อเนื่อง, มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อตับของเด็กชายชาวแอฟริกันอายุ 8 ปี ที่เป็นมะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ (HCC). ก่อตั้งโดย Aden และคณะในปี 1979 ที่ห้องปฏิบัติการของ Barbara B. Knowles, สถาบัน Wistar, ฟิลาเดลเฟีย, สหรัฐอเมริกา [1] 
• เซลล์ HEP3B มีการรวมตัวของจีโนมไวรัสตับอักเสบบี (HBV) ในโครโมโซมของมัน
• เซลล์มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิว
• เซลล์ HEP3B มีจำนวนโครโมโซมแบบโมดอลเท่ากับ 60 ต่างจากเซลล์ HepG2 ที่ไม่มีโครโมโซมที่ 1 ที่มีการจัดเรียงใหม่

ความแตกต่างระหว่าง HepG2 และ Hep3B คืออะไร?

HepG2 และ HEP3B แตกต่างกันในจำนวนโครโมโซมต่อเซลล์ HEP3B มีโครโมโซม 60 ตัว ในขณะที่เซลล์ HepG2 มีโครโมโซมเฉลี่ย 55 ตัว นอกจากนี้ HepG2 ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกและไม่มีเชื้อไวรัสตับอักเสบบี ในขณะที่ HEP3B ก่อให้เกิดเนื้องอกและมีเชื้อไวรัสตับอักเสบบี

มะเร็งตับที่ขยายใหญ่ภายใต้กล้องจุลทรรศน์

การเพาะเลี้ยงข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ HEP3B

ความรู้เกี่ยวกับข้อมูลการเพาะเลี้ยงของสายเซลล์สามารถทำให้คุณจัดการกับมันได้ง่ายขึ้น ส่วนนี้จะครอบคลุมประเด็นสำคัญทั้งหมดสำหรับการเพาะเลี้ยงสายเซลล์ HEP3B HBV รวมถึง: เวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ Hep3B คืออะไร? สภาพการเพาะเลี้ยงของ HEP3B คืออะไร? คุณจะเพาะเลี้ยงเซลล์ HEP3B HCC ได้อย่างไร?

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HEP3B

เวลาสองเท่า:

เวลาที่ใช้ในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ HEP3B คือประมาณ 36 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์ไลน์มะเร็งตับนี้เกาะติด

อัตราส่วนการแบ่ง:

เซลล์ HEP3B ถูกเพาะเลี้ยงต่อในอัตราส่วน 1:2 ถึง 1:4 เซลล์ HEP3B ที่เกาะติดจะถูกล้างด้วย 1 x PBS แล้วนำไปบ่มกับสารละลายแยกเซลล์ Accutase หลังจาก 8 ถึง 10 นาที สื่อใหม่จะถูกเติมเข้าไป และเซลล์จะถูกปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่เก็บเกี่ยวได้จะถูกแขวนลอยอย่างระมัดระวังและเทลงในขวดที่มีสื่อเพาะเลี้ยงในอัตราส่วนการแบ่งที่แนะนำ

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

ใช้สื่ออาหารเลี้ยงเซลล์ EMEM ที่มี FBS 10%, NaHCO3 2.2 กรัม/ลิตร, L-Glutamine 2 มิลลิโมลาร์ และ Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HEP3B

เงื่อนไขการเจริญเติบโต: 

เซลล์ HEP3B ถูกเพาะเลี้ยงในตู้เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมความชื้นและมีการเติมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์อย่างต่อเนื่องที่ 5%

การเก็บรักษา: 

เซลล์ HEP3B ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C ในตู้แช่แข็งไฟฟ้าหรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

ตัวกลางแช่แข็งที่แนะนำสำหรับเซลล์ HEP3B คือ CM-1 หรือ CM-ACF. เซลล์จะถูกแช่แข็งโดยใช้กระบวนการแช่แข็งช้า ซึ่งอนุญาตให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1°C ต่อนาที เพื่อปกป้องความมีชีวิตของเซลล์.

กระบวนการละลาย

เซลล์ที่ถูกแช่แข็งจะถูกละลายในอ่างน้ำที่ตั้งไว้ที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จากนั้นเซลล์เหล่านี้จะถูกนำไปเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อสดและปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดองค์ประกอบของสื่อแช่แข็งที่หลงเหลืออยู่ เซลล์ที่เก็บรวบรวมได้จะถูกแขวนลอยและแบ่งใส่ขวดใหม่สำหรับการเจริญเติบโต

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 จำเป็นต้องใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HEP3B

 

ชั้นเซลล์ Hep3B ที่เกาะติดกันครึ่งหนึ่งของการเจริญเติบโตเต็มที่ ที่กำลังขยาย 10 เท่า และ 20 เท่า

เซลล์ไลน์ HEP3B: ข้อดีและข้อจำกัด

HEP3B เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งตับที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลาย ส่วนนี้จะเน้นที่ข้อดีและข้อจำกัดที่สำคัญของเซลล์มะเร็งตับเหล่านี้

ข้อดี

ข้อดีหลักของเซลล์ HEP3B คือ:

เพาะเลี้ยงง่าย

เซลล์ HEP3B ไม่มีข้อกำหนดที่ยุ่งยากในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ทำให้สามารถจัดการและดูแลรักษาในห้องปฏิบัติการวิจัยได้ง่าย ซึ่งช่วยให้ขั้นตอนการทดลองมีความเรียบง่ายยิ่งขึ้น

ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูง

เซลล์ HEP3B แสดงประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนที่ยอดเยี่ยม ทำให้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานดัดแปลงพันธุกรรมและการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของยีน

การก่อให้เกิดเนื้องอก

HEP3B เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma ที่สามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกได้เมื่อฉีดเข้าสู่หนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่อง ซึ่งช่วยในการศึกษาการเจริญเติบโตและการพัฒนาของมะเร็งโดยใช้แบบจำลอง xenograft ของ HEP3B

สถานะของ HEP3B P53

เซลล์ HEP3B มีการกลายพันธุ์ของยีน P53 ที่คล้ายกับมะเร็งตับ (HCC) และมะเร็งชนิดอื่น ๆ ทำให้เซลล์เหล่านี้มีความเกี่ยวข้องกับการศึกษาผลกระทบของการกลายพันธุ์ของ P53 ต่อการเจริญเติบโต การพัฒนา และการลุกลามของมะเร็ง

 

ข้อจำกัด

ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับสายเซลล์ HEP3B คือ:

แบบจำลองเซลล์ในหลอดทดลอง

เซลล์ไลน์ HEP3B ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองของเซลล์มะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma (HCC) อย่างไรก็ตาม เซลล์ไลน์นี้อาจไม่สามารถสะท้อนความซับซ้อนของ HCC ที่พบในสิ่งมีชีวิตได้อย่างสมบูรณ์ ดังนั้น ผลการทดลองในหลอดทดลองอาจแตกต่างจากสิ่งที่พบในร่างกายจริง

 

การประยุกต์ใช้เซลล์ HEP3B ในการวิจัย

เซลล์ไลน์ HEP3B มีประโยชน์ในการวิจัยหลายด้านในด้านการวิจัยชีวการแพทย์. ประโยชน์ทางการวิจัยที่สำคัญของเซลล์ HEP3B ได้แก่:

• ชีววิทยาของมะเร็ง: HEP3B เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma ในมนุษย์ เป็นแบบจำลองเซลล์ที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาโครงสร้างและกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการพัฒนาและการลุกลามของมะเร็งตับ นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้ในการศึกษาการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม กระบวนการภายในเซลล์ และเส้นทางสัญญาณของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งตับ เช่น การศึกษาหนึ่งได้ใช้เซลล์ HEP3B และพบว่า microRNA-223-3p มีบทบาทในการควบคุมองค์ประกอบของ NLRP3 inflammasome, ยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์ และเพิ่มการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์มะเร็งตับ HEP3B [2]
• การคัดกรองและพัฒนายา: สายพันธุ์เซลล์ HEP3B ยังถูกใช้ในการทดสอบ คัดกรอง และพัฒนายารักษาใหม่สำหรับมะเร็งตับ นอกจากนี้ยังใช้ในการประเมินความเป็นพิษและประสิทธิภาพของยาและวิธีการรักษามะเร็งชนิดต่างๆ นักวิจัยยังใช้เซลล์มะเร็งตับเหล่านี้เพื่อศึกษาการเผาผลาญยา นักวิจัยใช้เซลล์ HEP3B และประเมินศักยภาพในการเป็นพิษต่อเซลล์ของสารสกัดจากพืช Cotinus coggygria ต่อเซลล์มะเร็งตับ HEP3B [3]
• การติดเชื้อไวรัส: HEP3B เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีเชื้อไวรัสตับอักเสบบี (HBV) จึงถูกนำมาใช้ในการศึกษาการติดเชื้อไวรัสที่อาจนำไปสู่การพัฒนาเป็นมะเร็งตับ เช่น HBV และ HCV ซึ่งอาจช่วยในการทำความเข้าใจการติดเชื้อไวรัสได้ดีขึ้นและพัฒนาการรักษาต้านไวรัสที่มีศักยภาพ ตัวอย่างเช่น การศึกษาหนึ่งได้ใช้เซลล์มะเร็งเซลล์ตับ HEP3B และตรวจสอบความสำคัญของการยูบิควิทิเนชันต่อการแพร่กระจายของไวรัสตับอักเสบซี ผลการศึกษาชี้ให้เห็นว่า โปรตีเอสยูบิควิตินเฉพาะ 15 (USP15) มีส่วนเกี่ยวข้องในการแพร่กระจายของไวรัสตับอักเสบซี (HCV) ผ่านการควบคุมหน้าที่เฉพาะของเซลล์ตับ รวมถึงการสร้างหยดไขมันและการแปลรหัส RNA ของไวรัสตับอักเสบซี [4]

5. สิ่งพิมพ์เกี่ยวกับสายเซลล์ HEP3B

ส่วนนี้จะครอบคลุมงานวิจัยที่น่าสนใจบางฉบับเกี่ยวกับเซลล์ HEP3B

การควบคุมการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสและออโตฟาจีโดยลูทีโอลินในเซลล์มะเร็งตับมนุษย์ Hep3B

การตีพิมพ์ในวารสาร Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) เสนอว่าความเครียดในเอนโดพลาสมิกเรติคูลัมที่เกิดจากสารประกอบลูทีโอลินอาจออกฤทธิ์ต้านเนื้องอกในเซลล์ HEP3B ที่ไม่มี P53 ในลักษณะที่ไม่ขึ้นกับ P53

ศักยภาพในการมุ่งเป้าเซลล์มะเร็งตับ Hep3B โดยลูเปออลที่สกัดจาก Avicennia marina

การศึกษาในวารสาร Archiv der Pharmazie (2021) ได้เสนอให้ลูพีออล ซึ่งเป็นไตรเทอร์พีนอยด์เพนตาไซคลิก เป็นสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพต่อเซลล์ HEP3B

สารสกัดเอทานอลจาก Cnidium monnieri (L.) Cusson กระตุ้นการหยุดวงจรเซลล์และการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสผ่านการควบคุมเส้นทางที่ไม่ขึ้นกับ p53 ในเซลล์มะเร็งตับชนิด HepG2 และ Hep3B

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ใน Molecular Medicine Reports (2017) ผลการศึกษาพบว่า สารสกัดเอทานอลจาก Cnidium monnieri (L.) Cusson สามารถเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์ (อะพอพโทซิส) และการหยุดชะงักของวัฏจักรเซลล์ในเซลล์มะเร็งตับ HepG2 และ HEP3B ผ่านการควบคุมเส้นทางสัญญาณ p53 และ Akt/GSK-3β

Auranofin เพิ่มการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสที่เกิดจากซัลโฟราเฟนในเซลล์มะเร็งตับ Hep3B ผ่านการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/Akt

งานวิจัยที่ตีพิมพ์ใน Biomolecules and Therapeutics (2020) เสนอว่าออโรนาฟินแสดงฤทธิ์เสริมฤทธิ์และส่งเสริมการตายของเซลล์ HEP3B ที่ถูกกระตุ้นโดยซัลโฟราเฟนผ่านทางการกระตุ้นเส้นทาง PI3K/AKT

Circular RNA‐0072309 มีฤทธิ์ต้านมะเร็งในเซลล์ไลน์ Hep3B โดยมุ่งเป้าไปที่ microRNA‐665

บทความวิจัยใน BioFactors (2023) เสนอว่า circular RNA-0072309 มีฤทธิ์ต้านเนื้องอกในเซลล์มะเร็งตับ HEP3B โดยมุ่งเป้าไปที่ miRNA-665

ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ HEP3B: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนที่มีเกี่ยวกับเซลล์ HEP3B:

• การถ่ายยีน HEP3B: วิดีโอนี้จะอธิบายขั้นตอนการถ่ายยีนสำหรับเซลล์ HEP3B
• ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีน HEP3B: ลิงก์นี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้เกี่ยวกับองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ HEP3B DMEM, การเพาะเลี้ยงเซลล์, และโปรโตคอลการถ่ายโอนยีนสำหรับเซลล์ HEP3B นอกจากนี้ยังมีข้อมูลสำหรับการปรับให้เหมาะสมกับสารลิโพเฟคตาไมน์ 3000 สำหรับการถ่ายโอนยีนในโปรโตคอลของคุณ

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ HEP3B:

• เงื่อนไขการเพาะเลี้ยง HEP3B: ลิงก์นี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้โปรโตคอลสำหรับการจัดการและบำรุงรักษาวัฒนธรรม Huh7 และ HEP3B
• เซลล์ HEP3B: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลมากมายเกี่ยวกับเซลล์ HEP3B รวมถึงสื่อเลี้ยงเซลล์ HEP3B, โปรโตคอลสำหรับการแบ่งเซลล์, การละลายน้ำแข็ง และการจัดการกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เพิ่มจำนวนและเซลล์ที่เก็บรักษาด้วยความเย็น

เอกสารอ้างอิง

1. พุทธาหะนะมุนทระยัปปะ, แอล.ดี., และคณะ, ต้นกำเนิดและคุณสมบัติของเซลล์ไลน์มะเร็งตับชนิด hepatocellular carcinoma. วารสารวิจัยทางเดินอาหารและตับญี่ปุ่น, 2021. 1(8): หน้า 1040.
2. วาน, แอล., และคณะ, miRNA-223-3p ควบคุม NLRP3 เพื่อส่งเสริมการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสและยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ hep3B. การแพทย์เชิงทดลองและการรักษา, 2018. 15(3): หน้า 2429-2435.
3. Danjolli-Hashani, D. และ S. Selen-Isbilir, ผลกระทบต่อเซลล์มะเร็งของสารสกัดจาก Cotinus coggygria ต่อเซลล์มะเร็งชนิด Hep3B. Natural Product Research, 2022: หน้า 1-4.
4. คุซาคาเบะ, เอส., และคณะ, USP15 มีส่วนร่วมในการแพร่กระจายของไวรัสตับอักเสบซีผ่านการควบคุมการแปล RNA ของไวรัสและการสร้างหยดไขมัน. วารสารไวรัสวิทยา, 2019. 93(6): หน้า 10.1128/jvi. 01708-18.