Hep3B 細胞：肝細胞癌的研究與發現

HEP3B 是一種源自人類的不朽化肝細胞癌細胞系，廣泛應用於肝毒性及藥物代謝研究。 HEP3B 的轉染效率極高；因此，這些細胞常被用於研究肝癌的發病、進展及治療干預措施。本文涵蓋了關於 HEP3B 細胞系的所有必要資訊，以協助您進行相關研究。主要內容包括：

1. HEP3B 細胞的一般特性與來源
2. HEP3B 細胞系的培養資訊
3. HEP3B 細胞系：優點與限制
4. HEP3B 細胞在研究中的應用
5. 關於 HEP3B 細胞系的文獻
6. HEP3B 細胞系的相關資源：操作手冊、影片及其他

HEP3B 細胞的一般特性與來源

關於細胞系，您最需要了解的基本資訊是其來源與一般特性。這些資訊有助於您決定在研究中如何運用該細胞系，並協助您妥善處理相關事宜。本文節將涵蓋關於 HEP3B 來源與特性的所有重要資訊。 您將在此了解：何謂 HEP3B 細胞系？HEP3B 細胞的來源為何？HEP3B 細胞的形態為何？

• HEP3B 是一種持續性人類肝癌細胞系，源自一名患有肝細胞癌（HCC）的 8 歲非洲男童的肝臟組織。 該細胞系由 Aden 及其同事於 1979 年在美國費城威斯塔研究所（Wistar Institute）的 Barbara B. Knowles 實驗室建立 [1]。 
• HEP3B 細胞的染色體中整合了 B 型肝炎病毒（HBV）基因組。
• 這些肝細胞癌細胞呈現上皮形態。
• HEP3B 細胞的模態染色體數為 60。與 HepG2 不同，它們不具備重排的第 1 號染色體。

HepG2 與 Hep3B 之間有何差異？

HepG2 與 HEP3B 在每細胞的染色體數目上有所不同。HEP3B 含有 60 條染色體，而 HepG2 細胞平均則有 55 條染色體。此外，HepG2 不具致瘤性且乙型肝炎病毒檢測呈陰性，而 HEP3B 則具致瘤性且乙型肝炎病毒檢測呈陽性。

在顯微鏡下高倍放大觀察到的肝細胞癌。

關於 HEP3B 細胞系的培養資訊

了解細胞系的培養資訊，能讓您更輕鬆地進行操作。本節涵蓋了培養 HEP3B HBV 細胞系的所有關鍵要點，包括：HEP3B 細胞的倍增時間是多少？HEP3B 的培養條件為何？該如何培養 HEP3B 肝細胞癌 (HCC) 細胞？

HEP3B 細胞培養的重點

倍增時間：

HEP3B 細胞的倍增時間約為 36 小時。

貼壁或懸浮培養：

此肝癌細胞系屬於貼壁型。

傳代比例：

HEP3B 細胞的傳代比例為 1:2 至 1:4。將貼壁的 HEP3B 細胞以 1×PBS 沖洗後，再與 Accutase 解離液一起孵育。 8 至 10 分鐘後，加入新鮮培養基，並將細胞離心。隨後將收集到的細胞小心重懸，並按建議的分裂比例倒入含有培養基的培養瓶中。

生長培養基：

HEP3B 細胞的培養使用含有 10% FBS、2.2 g/L NaHCO₃、2 mM L-谷胺醯胺及 Earle's 平衡鹽溶液 (EBSS) 的 EMEM 培養基。

生長條件： 

HEP3B 細胞於 37°C 加濕培養箱中培養，並持續供應 5% 二氧化碳。

儲存： 

冷凍的 HEP3B 細胞應儲存於電冷凍櫃中，溫度需低於 -150°C，或儲存於液態氮的氣相中。

冷凍程序與培養基：

建議用於 HEP3B 細胞的冷凍培養基為 CM-1 或 CM-ACF。為保護細胞存活率，應採用緩慢冷凍法，使溫度每分鐘僅下降 1°C。

解凍程序：

將冷凍細胞置於預先設定為 37°C 的水浴中解凍 40 至 60 秒。隨後將這些細胞加入新鮮的培養基中，並進行離心以去除冷凍培養基中的成分。收集的細胞經重新懸浮後，分裝至新的培養瓶中進行培養。

生物安全等級：

HEP3B 細胞培養需在生物安全等級 1 的實驗室中進行。

 

在 10× 和 20× 放大倍率下觀察到的 Hep3B 細胞緊密附著且半融合的細胞層。

HEP3B 細胞系：優點與限制

HEP3B 是一種廣泛應用的肝細胞癌細胞系。本節將著重探討此類肝癌細胞的一些關鍵優點與限制。

優點

HEP3B 細胞的主要優點包括：

易於培養

HEP3B 細胞對培養條件要求不高，因此在研究實驗室中易於操作與維護，這簡化了實驗流程。

高轉染效率

HEP3B 細胞展現出卓越的轉染效率，因此廣泛應用於基因操作及基因表達相關研究。

致瘤性

HEP3B 是一種具致瘤性的肝細胞癌細胞系，當注入免疫缺陷小鼠體內時，能夠形成腫瘤。這有助於利用 HEP3B 異種移植模型來研究癌症的進展與發展。

HEP3B 的 P53 狀態

HEP3B 細胞具有與肝細胞癌（HCC）及其他癌症相似的 P53 基因突變，因此非常適合用於研究 P53 突變對癌症生長、發展及進展的影響。

 

限制

與 HEP3B 細胞系相關的限制如下：

體外細胞模型

HEP3B 細胞系作為肝細胞癌（HCC）細胞的體外模型。然而，它可能無法完全反映活體內 HCC 的複雜性。因此，體外實驗結果可能與體內觀察到的結果有所不同。

 

HEP3B 細胞在研究中的應用

HEP3B 細胞系在生物醫學研究中具有多種應用。HEP3B 細胞的一些主要研究應用包括：

• 癌症生物學：HEP3B 是一種人類肝細胞癌細胞系。它是探究 HCC 發病與進展背後細胞及分子機制不可或缺的細胞模型。研究人員利用這些細胞來研究與肝癌相關的基因突變、細胞過程及細胞訊號傳導路徑。 例如一項研究利用 HEP3B 細胞發現，microRNA-223-3p 可調控 NLRP3 炎性小體的組成成分，抑制 HEP3B 肝細胞癌細胞的增殖，並促進其凋亡 [2]。
• 藥物篩選與開發：HEP3B 細胞系亦用於測試、篩選及開發針對肝細胞癌的新型治療藥物。此外，它還用於評估不同抗癌藥物及治療方案的毒性與療效。 研究人員亦利用這些肝癌細胞來研究藥物代謝。研究人員採用 HEP3B 細胞，評估了 Cotinus coggygria 植物萃取物對 HEP3B 肝細胞癌細胞的細胞毒性潛力 [3]。
• 病毒感染：HEP3B 為乙型肝炎病毒（HBV）陽性細胞系；因此，它被用於研究可能導致肝癌發生的病毒感染，例如 HBV 和 HCV。這有助於更深入理解病毒感染機制，並開發潛在的抗病毒治療方法。 例如，一項研究利用 HEP3B 肝細胞癌細胞，探討泛素化對丙型肝炎病毒傳播的重要性。 研究結果顯示，泛素特異性蛋白酶 15（USP15）透過調節肝細胞特異性功能（包括脂滴形成與 HCV RNA 轉譯）參與 HCV 的傳播 [4]。

5. 關於 HEP3B 細胞系的相關文獻

本文此節將介紹幾篇關於 HEP3B 細胞的有趣研究文獻。

槲皮素對人類肝細胞癌 HEP3B 細胞中凋亡與自噬的調控

這篇發表於《生物化學與生物物理研究通訊》（2019）的論文提出，木犀草素誘導的內質網壓力，可能以一種不依賴於P53的方式，在P53缺失的HEP3B細胞中發揮抗腫瘤作用。

從海榕（Avicennia marina）中分離出的盧佩醇對HEP3B肝癌細胞的潛在靶向作用

這項發表於《藥學檔案》（2021年）的研究提出，五環三萜類化合物「盧佩醇」可能是針對HEP3B細胞的潛在抗癌藥物。

Cnidium monnieri (L.) Cusson 的乙醇萃取物透過調節 p53 獨立途徑，在 HepG2 和 Hep3B 肝細胞癌細胞中誘導細胞週期停滯與凋亡

此篇論文發表於《分子醫學報告》（2017年）。 研究結果指出，Cnidium monnieri (L.) Cusson 的乙醇萃取物透過調節 p53 及 Akt/GSK-3β 訊號傳導路徑，在肝細胞癌細胞 HepG2 和 HEP3B 中誘導細胞死亡（凋亡）及細胞週期停滯。

奧拉諾芬透過失活PI3K/Akt訊號傳導路徑，增強硫代葡萄糖苷介導的Hep3B肝細胞癌細胞凋亡

這項發表於《Biomolecules and Therapeutics》（2020年）的研究提出，奧拉諾芬展現協同作用，並透過活化PI3K/AKT路徑，促進硫代葡萄糖苷介導的HEP3B細胞凋亡。

環狀RNA-0072309 透過靶向微RNA-665 在 Hep3B 細胞系中發揮抗腫瘤作用

這篇發表於《BioFactors》（2023年）的研究論文提出，環狀RNA-0072309是透過靶向miRNA-665，在肝細胞癌細胞HEP3B中發揮抗腫瘤作用。

HEP3B 細胞系相關資源：實驗方案、影片及其他

以下是關於 HEP3B 細胞的若干資源：

• HEP3B 轉染：此影片將說明 HEP3B 細胞的轉染操作流程。
• HEP3B 轉染效率：此連結將協助您了解 HEP3B DMEM 培養基成分、細胞傳代以及 HEP3B 細胞的轉染操作流程。此外，它還提供有關如何在您的轉染操作流程中優化 HEP3B Lipofectamine 3000 試劑的資訊。

以下連結包含 HEP3B 細胞培養操作流程：

• HEP3B 培養條件：此連結將協助您了解 Huh7 及 HEP3B 細胞培養的處理與維護流程。
• HEP3B 細胞：此網站提供大量關於 HEP3B 細胞的資訊，包括 HEP3B 培養基、細胞傳代、解凍，以及增殖性與冷凍保存細胞培養的操作流程。

參考文獻

1. Puttahanumantharayappa, L.D. 等，肝細胞癌細胞系的起源與特性。《日本胃腸病學研究雜誌》，2021年，1(8)：第1040頁。
2. Wan, L. 等，miRNA-223-3p 透過調節 NLRP3 來促進 Hep3B 細胞凋亡並抑制其增殖。《實驗與治療醫學》，2018. 15(3): 第 2429-2435 頁。
3. Danjolli-Hashani, D. 與 S. Selen-Isbilir，《Cotinus coggygria 萃取物對 Hep3B 癌細胞系的細胞毒性作用》。《天然產物研究》，2022：第 1-4 頁。
4. Kusakabe, S. 等，USP15 透過調節病毒 RNA 翻譯及脂滴形成，參與 C 型肝炎病毒的傳播。 《病毒學雜誌》，2019年，93(6)：頁 10.1128/jvi. 01708-18。