İçeriğe atla
HROC18
Doku
Kolon (çekum), UICC I
Hastalık
Primer adenokarsinom, TNM evresi T2N0M0 R0L0V0, derecelendirme G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastaz yeri
Uygulanamaz (UICC evre I; TNM T2N0M0; bölgesel veya uzak metastaz yok)
Eş anlamlılar
HROC 18

Belgeler

HROC18

Cell line · Ürün numarası 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu, 2006 yılından bu yana PD Dr. Michael Linnebacher tarafından kurulan bir dizi tümör hücre hattından biridir. HROC18 birincil berrak hücreli adenokarsinomdan türetilmiştir. Hücreler belirsiz sınırlara sahip küreseldir, yüksek çekirdek-sitoplazma oranına sahiptir ve hem mikrovillus hem de desmozomlar sergiler. Yumuşak agar içinde kültürlenebilirler.
Doku
Kolon (çekum), UICC I
Hastalık
Primer adenokarsinom, TNM evresi T2N0M0 R0L0V0, derecelendirme G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastaz yeri
Uygulanamaz (UICC evre I; TNM T2N0M0; bölgesel veya uzak metastaz yok)
Uygulamalar
Kolorektal kanser araştırmaları; erken evre kolorektal kanserin biyolojisi; APC/p53 mutasyonlu kolorektal kanser modellemesi; ilaç duyarlılığı ve hedefe yönelik tedavi değerlendirmesi; kolorektal kanser immünolojisi; hastalarla eşleştirilmiş HROC biyobank çalışmaları
Eş anlamlılar
  • HROC 18

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış çıplak farelerde
Ploidi durumu
Aneuploid
MSI durumu
MSS
İki katına çıkma süresi
30 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROC18 (Cytion katalog numarası 300808)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0B45

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Beta-aktin, osteopontin, PTEN
Antijen ekspresyonu
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD 54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+ , CD80- , CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Mutasyon profili
APCmut, p53mut, K-Raswt, N-Raswt, H-Raswt, B-RAFwt, PIK3CA mut
Virüsler
İnsan patojenik virüsleri HBV, HCV, HIV içermez.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
1 ila 2 hafta
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
65 yıl
Etnik köken
Kafkas