Gå direkte til indholdet
HROC18
Væv
Tyktarmen (coecum), UICC I
Sygdom
Primært adenokarcinom, TNM-stadie T2N0M0 R0L0V0, gradering G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastasested
Ikke relevant (UICC-stadium I; TNM T2N0M0; ingen regional eller fjernmetastase)
Synonymer
HROC 18

Dokumenter

HROC18

Cell line · Varenummer 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Begrænset lagerbeholdning
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Dette er en cellelinje i en serie af tumorcellelinjer, som er blevet etableret af PD Dr. Michael Linnebacher siden 2006. HROC18 stammer fra et primært klarcellet adenokarcinom. Cellerne er kugleformede med utydelige grænser, har et højt forhold mellem kerne og cytoplasma og udviser både mikrovilli og desmosomer. De kan dyrkes i blød agar.
Væv
Tyktarmen (coecum), UICC I
Sygdom
Primært adenokarcinom, TNM-stadie T2N0M0 R0L0V0, gradering G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastasested
Ikke relevant (UICC-stadium I; TNM T2N0M0; ingen regional eller fjernmetastase)
Anvendelser
Forskning i kolorektal kræft; biologi ved kolorektal kræft i tidlige stadier; modellering af kolorektal kræft med APC/p53-mutationer; vurdering af lægemiddelfølsomhed og målrettet behandling; immunologi ved kolorektal kræft; HROC-biobankundersøgelser med patientmatchede prøver
Synonymer
  • HROC 18

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Tumorfremkaldende
Yeees, i immunsupprimerede nøgenmus
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
MSS
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HROC18 (Cytion katalognummer 300808)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0B45

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Beta-actin, osteopontin, PTEN
Antigenudtryk
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD 54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+, CD80-, CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Mutationsprofil
APCmut, p53mut, K-Raswt, N-Raswt, H-Raswt, B-RAFwt, PIK3CA mut
Vira
Fri for humanpatogene vira HBV, HCV, HIV.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
1 til 2 uger
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
65 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk