Mine otse sisu juurde
HROC18
Kude
Jämesool (coecum), UICC I
Haigus
Primaarne adenokartsinoom, TNM staadium T2N0M0 R0L0V0, liigitus G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (UICC I staadium; TNM T2N0M0; puuduvad piirkondlikud või kaugmetastaasid)
Sünonüümid
HROC 18

Dokumendid

HROC18

Cell line · Toote number 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus
Tegemist on ühe rakuliiniga kasvajarakkude seeriast, mille PD Dr. Michael Linnebacher on loonud alates 2006. aastast. HROC18 on saadud primaarsest selgrotsest adenokartsinoomist. Rakud on kerakujulised, ebaselge piiriga, neil on suur tuumade ja tsütoplasma suhe ning neil on nii mikrovillide kui ka desmosoomide olemasolu. Neid saab kasvatada pehmel agaril.
Kude
Jämesool (coecum), UICC I
Haigus
Primaarne adenokartsinoom, TNM staadium T2N0M0 R0L0V0, liigitus G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (UICC I staadium; TNM T2N0M0; puuduvad piirkondlikud või kaugmetastaasid)
Rakendused
Kolorektaalvähi uurimine; varajases staadiumis kolorektaalvähi bioloogia; APC/p53-mutatsiooniga kolorektaalvähi modelleerimine; ravimite tundlikkuse ja sihtterapia hindamine; kolorektaalvähi immunoloogia; patsientidele sobivate HROC-biopankade uuringud
Sünonüümid
  • HROC 18

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Tuumorigeenne
Jah, immuunsupressiooniga alasti hiirtel
Ploidsus
Aneuploidne
MSI staatus
MSS
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
HROC18 (Cytioni katalooginumber 300808)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0B45

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Beeta-aktiiviin, osteopontin, PTEN
Antigeeni ekspressioon
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD 54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+ , CD80- , CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Mutatsiooniprofiil
APCmut, p53mut, K-Raswt, N-Raswt, H-Raswt, B-RAFwt, PIK3CA mut
Viirused
Vaba inimpatogeensetest viirustest HBV, HCV, HIV.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
1 kuni 2 nädalat
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
65 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia