Tartalomra ugrás
HROC18
Szövet
Vastagbél (coecum), UICC I
Betegség
Primer adenokarcinóma, TNM stádium T2N0M0 R0L0V0, osztályozás G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Áttétes hely
Nem alkalmazandó (UICC I. stádium; TNM T2N0M0; nincs regionális vagy távoli áttét)
Szinonimák
HROC 18

Dokumentumok

HROC18

Cell line · Termékszám 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Kevés a készlet
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás
Ez az egyik sejtvonal egy olyan tumorsejtvonal-sorozatból, amelyet 2006 óta PD Dr. Michael Linnebacher hozott létre. A HROC18 egy primer tiszta sejtes adenokarcinómából származik. A sejtek gömbölydedek, és a határaik nem egyértelműek, a sejtmag és a citoplazma aránya magas, és mind mikrovillákat, mind deszmoszómákat mutatnak. Lágy agarban tenyészthetők.
Szövet
Vastagbél (coecum), UICC I
Betegség
Primer adenokarcinóma, TNM stádium T2N0M0 R0L0V0, osztályozás G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Áttétes hely
Nem alkalmazandó (UICC I. stádium; TNM T2N0M0; nincs regionális vagy távoli áttét)
Alkalmazások
Vastagbél- és végbélrák kutatása; a korai stádiumú vastagbél- és végbélrák biológiája; az APC/p53 mutációval rendelkező vastagbél- és végbélrák modellezése; gyógyszerérzékenység és célzott terápiák értékelése; a vastagbél- és végbélrák immunológiája; a betegekhez illesztett HROC-biobanki vizsgálatok
Szinonimák
  • HROC 18

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
Daganatképző
Igen, immunszupprimált meztelen egerekben
Ploidiaállapot
Aneuploid
MSI állapot
MSS
Kettőzési idő
30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HROC18 (Cytion katalógusszám: 300808)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0B45

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Béta-aktin, osteopontin, PTEN
Antigén-expresszió
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD 54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+ , CD80-, CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Mutációs profil
APCmut, p53mut, K-Raswt, N-Raswt, H-Raswt, B-RAFwt, PIK3CA mutáció
Vírusok
HBV, HCV, HIV humán patogén vírusoktól mentes.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
3-5 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
1-2 hét
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
65 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi