Премини към съдържанието
HROC18
Тъкан
Дебело черво (coecum), UICC I
Заболяване
Първичен аденокарцином, TNM стадий T2N0M0 R0L0V0, степен G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Място на метастазите
Неприложимо (стадий I по UICC; TNM T2N0M0; без регионални или отдалечени метастази)
Синоними
HROC 18

Документи

HROC18

Cell line · Номер на продукта 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

€800.00без ДДС и доставка
Наличността е ниска
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание
Това е една клетъчна линия от поредица туморни клетъчни линии, създадени от д-р Майкъл Линебахер от 2006 г. насам. HROC18 е получена от първичен светлоклетъчен аденокарцином. Клетките са кълбовидни с неясни граници, имат високо съотношение между ядрото и цитоплазмата и показват както микровили, така и десмозоми. Могат да се култивират в мек агар.
Тъкан
Дебело черво (coecum), UICC I
Заболяване
Първичен аденокарцином, TNM стадий T2N0M0 R0L0V0, степен G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Място на метастазите
Неприложимо (стадий I по UICC; TNM T2N0M0; без регионални или отдалечени метастази)
Приложения
Изследвания в областта на колоректалния рак; биология на колоректалния рак в ранен стадий; моделиране на колоректален рак с мутации в гените APC и p53; оценка на лекарствената чувствителност и целевата терапия; имунология на колоректалния рак; проучвания с биобанка от високорискови колоректални ракови тъкани (HROC), подбрани според конкретния пациент
Синоними
  • HROC 18

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Туморогенен
Да, при имуносупресирани голи мишки
Плоидност
Анеуплоидни
Статус на MSI
MSS
Време за удвояване
30 часа

04Идентификатори

Източник
HROC18 (каталожен номер 300808 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0B45

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Бета-актин, остеопонтин, PTEN
Експресия на антигена
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD 54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+ , CD80- , CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Мутационен профил
APCmut, p53mut, K-Raswt, N-Raswt, H-Raswt, B-RAFwt, PIK3CA mut
Вируси
Без човешки патогенни вируси HBV, HCV, HIV.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/см2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
1 до 2 седмици
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
65 години
Етническа принадлежност
Кавказки