HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano derivada de una muestra de tumor primario extirpada de un paciente adulto, perteneciente a la colección modelo HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La designación «T2» indica que el tumor se obtuvo en una segunda intervención quirúrgica, mientras que «M1» denota el modelo in vitro correspondiente establecido a partir de esta muestra. La plataforma HROC integra un biobanco integral con la generación estandarizada de xenoinjertos derivados de pacientes (PDX) y líneas celulares permanentes de bajo número de pases, lo que permite obtener modelos tumorales con anotaciones moleculares a partir de casos consecutivos de cáncer colorrectal.

El establecimiento de HROC300 T2 M1 siguió un protocolo estandarizado que incluyó la disociación mecánica del tejido tumoral recién resecado, la filtración para obtener suspensiones de células individuales y la siembra en placas de cultivo recubiertas de colágeno en un medio de cultivo de células tumorales definido, suplementado con glutamina, antibióticos y antimicóticos. En toda la cohorte HROC, se generaron líneas celulares primarias permanentes a partir de aproximadamente el 13 % de las muestras de carcinoma colorrectal analizadas, y el establecimiento exitoso se correlacionó, en el análisis univariante, con un grado tumoral más alto y un estado ganglionar avanzado. El análisis multivariante identificó la afectación ganglionar como un predictor independiente del establecimiento exitoso del modelo in vitro. Estos hallazgos reflejan el enriquecimiento de fenotipos biológicamente agresivos entre los cultivos adaptados con éxito.

Dentro de la colección más amplia de HROC, los modelos abarcan todos los subtipos moleculares principales del carcinoma colorrectal, incluyendo la inestabilidad cromosómica (CIN), el fenotipo de metilación de islas CpG (CIMP), los tumores con estabilidad de microsatélites (MSS) y los de alta inestabilidad de microsatélites (MSI-H), así como diversos antecedentes mutacionales que afectan genes como KRAS, BRAF, TP53, APC y PIK3CA. El HROC300 T2 M1 se generó en este contexto rigurosamente anotado, lo que permite su integración con datos clínico-patológicos correspondientes y, cuando estén disponibles, con el material PDX correspondiente. Como modelo de carcinoma colorrectal derivado de pacientes y de bajo número de pases, el HROC300 T2 M1 es adecuado para estudios de biología tumoral, asociaciones genotipo-fenotipo y pruebas terapéuticas preclínicas dentro de un marco de oncología de precisión.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.