Skip to content
HROC300 T2 M1
Tissue
קולורקטלי
Disease
אדנוקרצינומה, שלב TNM T4aN1bM1R2L0V1, דירוג G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
Metastatic site
קיימת גרורה מרוחקת (TNM M1; שלב T4aN1bM1R2)

Documents

HROC300 T2 M1

Cell line · Product number 300866

HROC300 T2 M1 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor specimen resected from an adult patient within the HROC (Hansestadt R...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROC300 T2 M1 הוא קו תאים של קרצינומה קולורקטלית אנושית שמקורו בדגימת גידול ראשוני שהוצא מחולה בוגר במסגרת אוסף המודלים HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). הסימון "T2" מציין שהגידול נלקח בניתוח שני, ואילו "M1" מציין את המודל המקביל שנוצר במבחנה מדגימה זו. פלטפורמת HROC משלבת ביו-בנק מקיף עם יצירה סטנדרטית של שתלים זרים שמקורם בחולים (PDX) וקווי תאים קבועים בעלי מעבר נמוך, המאפשרים יצירת מודלים של גידולים עם הערות מולקולריות ממקרים רצופים של סרטן המעי הגס.

הקמת HROC300 T2 M1 נעשתה על פי פרוטוקול סטנדרטי שכלל פירוק מכני של רקמת הגידול שנותחה זה עתה, סינון להשגת תמיסות תאים בודדים, וזירוז על צלחות תרבית מצופות קולגן בתרבית תאים מוגדרת של תאי גידול, בתוספת גלוטמין, אנטיביוטיקה ואנטימיקוטיקה. בכל קוהורטת HROC, קווי תאים ראשוניים קבועים נוצרו מכ-13% מדגימות קרצינומה של המעי הגס שנבדקו, כאשר הקמתם המוצלחת תואמת בניתוח חד-משתני לדירוג גבוה יותר של הגידול ולסטטוס בלוטות לימפה מתקדם. ניתוח רב-משתני זיהה מעורבות בלוטות לימפה כגורם מנבא עצמאי להקמת מודל מוצלח במבחנה. ממצאים אלה משקפים את העשרת הפנוטיפים הביולוגיים האגרסיביים בקרב תרבויות שהותאמו בהצלחה.

בתוך אוסף HROC הרחב יותר, המודלים כוללים את כל תתי-הסוגים המולקולריים העיקריים של קרצינומה של המעי הגס, כולל חוסר יציבות כרומוזומלית (CIN), פנוטיפ מתילציה של אי CpG (CIMP), מיקרו-לווין יציב (MSS) ומיקרו-לווין לא יציב (MSI-H), וכן רקעים מוטציוניים מגוונים המשפיעים על גנים כגון KRAS, BRAF, TP53, APC ו-PIK3CA. HROC300 T2 M1 נוצר בהקשר זה, המלווה בהערות קפדניות, המאפשרות שילוב עם נתונים קליניים-פתולוגיים תואמים, ובמידת האפשר, עם חומר PDX מתאים. כמודל קרצינומה של המעי הגס הנגזר מחולים, בעל מעבר נמוך, HROC300 T2 M1 מתאים למחקרים של ביולוגיה של גידולים, קשרים בין גנוטיפ לפנוטיפ, ובדיקות טיפוליות פרה-קליניות במסגרת אונקולוגיה מדויקת.

Tissue
קולורקטלי
Disease
אדנוקרצינומה, שלב TNM T4aN1bM1R2L0V1, דירוג G2, Lk(n) + 3, ∑ Lk(n) 22
Metastatic site
קיימת גרורה מרוחקת (TNM M1; שלב T4aN1bM1R2)
Applications
מחקר על סרטן המעי הגס; אדנוקרצינומה של המעי הגס מסוג MSS; מאגר הביולוגי HROC Linnebacher; רגישות לתרופות; מודלים של סרטן המעי הגס בשלב מתקדם; ביולוגיה של הגידול

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
MSI status
MSS

04Identifiers

Citation
HROC300 T2 M1 (מספר קטלוגי Cytion 300866)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ94

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
כל 3 עד 5 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
73 שנים
Ethnicity
קווקזי