HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 là dòng tế bào ung thư đại trực tràng của người được phân lập từ mẫu khối u nguyên phát được phẫu thuật cắt bỏ từ bệnh nhân người lớn trong bộ sưu tập mô hình HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). Ký hiệu “T2” cho biết khối u được thu thập tại thời điểm phẫu thuật thứ hai, trong khi “M1” chỉ mô hình in vitro tương ứng được thiết lập từ mẫu này. Nền tảng HROC tích hợp lưu trữ sinh học toàn diện với việc tạo ra các mô hình xenograft từ bệnh nhân (PDX) và dòng tế bào vĩnh viễn có số lần nhân bản thấp theo tiêu chuẩn, cho phép tạo ra các mô hình khối u được chú thích phân tử từ các trường hợp ung thư đại trực tràng liên tiếp.

Việc thiết lập HROC300 T2 M1 tuân theo quy trình tiêu chuẩn bao gồm phân tách cơ học mô khối u mới được phẫu thuật cắt bỏ, lọc để thu được hỗn hợp tế bào đơn lẻ, và gieo lên đĩa nuôi cấy phủ collagen trong môi trường nuôi cấy tế bào khối u được bổ sung glutamine, kháng sinh và kháng nấm. Trong nhóm HROC, dòng tế bào nguyên phát vĩnh viễn được tạo ra từ khoảng 13% mẫu ung thư đại trực tràng được thử nghiệm, với việc thiết lập thành công có liên quan trong phân tích đơn biến với mức độ phân loại khối u cao hơn và tình trạng hạch tiến triển. Phân tích đa biến xác định sự tham gia của hạch là yếu tố dự báo độc lập cho việc thiết lập thành công mô hình in vitro. Những phát hiện này phản ánh sự phong phú của các biểu hiện sinh học hung hãn trong các văn hóa được thích nghi thành công.

Trong bộ sưu tập HROC rộng hơn, các mô hình bao gồm tất cả các kiểu phân tử chính của ung thư đại trực tràng, bao gồm bất ổn nhiễm sắc thể (CIN), kiểu hình methyl hóa đảo CpG (CIMP), ổn định microsatellite (MSS) và không ổn định microsatellite cao (MSI-H), cũng như các nền tảng đột biến đa dạng ảnh hưởng đến các gen như KRAS, BRAF, TP53, APC và PIK3CA. HROC300 T2 M1 được tạo ra trong bối cảnh được chú thích kỹ lưỡng này, cho phép tích hợp với dữ liệu lâm sàng-giải phẫu tương ứng và, nếu có sẵn, vật liệu PDX tương ứng. Là một mô hình ung thư đại trực tràng được lấy từ bệnh nhân với số lần truyền thấp, HROC300 T2 M1 phù hợp cho các nghiên cứu về sinh học khối u, mối quan hệ giữa kiểu gen và kiểu hình, cũng như thử nghiệm điều trị tiền lâm sàng trong khung cảnh y học chính xác.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.