HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1系源自汉萨城市罗斯托克结直肠癌（HROC）模型库中成人患者原发肿瘤标本的人类结直肠癌细胞系。 其中"T2"标识该肿瘤样本取自第二次手术时间点，"M1"则表示由此建立的对应体外模型。HROC平台整合了综合生物样本库与标准化患者来源异种移植模型（PDX）及永久性低代次细胞系的建立流程，可为连续结直肠癌病例提供分子注释肿瘤模型。

HROC300 T2 M1的建立遵循标准化流程：对新鲜切除的肿瘤组织进行机械分离，经过滤获得单细胞悬液，随后接种于含谷氨酰胺、抗生素及抗真菌剂的定量肿瘤细胞培养基中，置于胶原蛋白包被的培养皿内培养。 在HROC队列中，约13%的结直肠癌样本成功建立永久性原代细胞系，单变量分析显示成功率与肿瘤分级较高及淋巴结转移晚期呈正相关。多变量分析证实淋巴结转移是体外模型建立成功的独立预测因子。这些发现表明成功适应培养的细胞系富集了生物学侵袭性表型。

在更广泛的HROC样本库中，建立的模型涵盖结直肠癌所有主要分子亚型，包括染色体不稳定性（CIN）、CpG岛甲基化表型（CIMP）、微卫星稳定型（MSS）及微卫星不稳定高型（MSI-H）肿瘤，同时涉及影响KRAS、 BRAF、TP53、APC及PIK3CA等基因的多种突变背景。 HROC300 T2 M1在严格注释的背景下建立，可整合匹配的临床病理数据及（如有）对应的PDX材料。作为低传代患者来源的结直肠癌模型，HROC300 T2 M1适用于精准肿瘤学框架下的肿瘤生物学研究、基因型-表型关联分析及临床前治疗测试。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。