HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 est une lignée cellulaire de carcinome colorectal humain dérivée d’un échantillon de tumeur primaire prélevé chez un patient adulte et issu de la collection modèle HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La désignation « T2 » indique que la tumeur a été prélevée lors d’une deuxième intervention chirurgicale, tandis que « M1 » désigne le modèle in vitro correspondant établi à partir de ce prélèvement. La plateforme HROC intègre une biobanque exhaustive à la production normalisée de xénogreffes dérivées de patients (PDX) et de lignées cellulaires permanentes à faible nombre de passages, permettant ainsi de créer des modèles tumoraux annotés sur le plan moléculaire à partir de cas consécutifs de cancer colorectal.

La mise en place de HROC300 T2 M1 a suivi un protocole normalisé comprenant la dissociation mécanique du tissu tumoral fraîchement réséqué, la filtration pour obtenir des suspensions de cellules individuelles, puis l’ensemencement sur des plaques de culture recouvertes de collagène dans un milieu de culture cellulaire tumoral défini, enrichi en glutamine, en antibiotiques et en antimycosiques. Au sein de la cohorte HROC, des lignées cellulaires primaires permanentes ont été générées à partir d’environ 13 % des échantillons de carcinome colorectal soumis à cette tentative; la réussite de l’établissement était corrélée, en analyse univariée, à un grade tumoral plus élevé et à un statut ganglionnaire avancé. L’analyse multivariée a permis d’identifier l’atteinte ganglionnaire comme un facteur prédictif indépendant de la réussite de l’établissement du modèle in vitro. Ces résultats reflètent l’enrichissement en phénotypes biologiquement agressifs parmi les cultures ayant été adaptées avec succès.

Au sein de la collection HROC plus large, les modèles englobent tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris l’instabilité chromosomique (CIN), le phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), les tumeurs à microsatellites stables (MSS) et à instabilité élevée des microsatellites (MSI-H), ainsi que divers profils mutationnels affectant des gènes tels que KRAS, BRAF, TP53, APC et PIK3CA. Le modèle HROC300 T2 M1 a été généré dans ce contexte rigoureusement annoté, ce qui permet son intégration avec des données clinico-pathologiques appariées et, le cas échéant, avec le matériel PDX correspondant. En tant que modèle de carcinome colorectal dérivé de patients et à faible nombre de passages, HROC300 T2 M1 convient aux études sur la biologie tumorale, aux associations génotype-phénotype et aux essais thérapeutiques précliniques dans le cadre de l’oncologie de précision.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.