HROC300 T2 M1

HROC300 T2 M1 是一種源自 HROC（漢薩城市羅斯托克結直腸癌）模型收藏中，從一名成人患者切除的原發性腫瘤標本所建立的人類結直腸癌細胞系。 「T2」的標示表示該腫瘤樣本是在第二次手術時點取得，而「M1」則表示從該樣本建立的相應體外模型。 HROC 平台整合了全面的生物樣本庫與標準化的患者來源異種移植模型（PDX）及永久性低傳代次數細胞系的建立，從而能夠針對連續的結直腸癌病例建立具有分子標註的腫瘤模型。

HROC300 T2 M1 的建立遵循標準化流程，包括對新鮮切除的腫瘤組織進行機械性分離、過濾以獲得單細胞懸浮液，並將其接種於膠原蛋白包被的培養板中，培養基為添加了谷氨醯胺、抗生素及抗真菌劑的特定腫瘤細胞培養基。 在 HROC 隊列中，約 13% 的嘗試建立原發性細胞系的結直腸癌樣本成功建立了永久性原發性細胞系；單變量分析顯示，成功建立與較高的腫瘤分級及晚期淋巴結轉化狀態呈正相關。 多變量分析指出，淋巴結轉化是成功建立體外模型的獨立預測因子。這些發現反映出，在成功適應的培養物中，生物學上具侵襲性的表型比例較高。

在更廣泛的 HROC 樣本庫中，這些模型涵蓋了結直腸癌的所有主要分子亞型，包括染色體不穩定（CIN）、 CpG島甲基化表型（CIMP）、微衛星穩定型（MSS）及微衛星不穩定高型（MSI-H）腫瘤，以及影響KRAS、BRAF、TP53、APC和PIK3CA等基因的各種突變背景。 HROC300 T2 M1 即是在此嚴謹註釋的背景下建立，可與配對的臨床病理資料整合，並在可取得的情況下，與相應的患者來源模型（PDX）材料進行整合。 作為低傳代數的患者來源結直腸癌模型，HROC300 T2 M1 適用於在精準腫瘤學框架下進行腫瘤生物學研究、基因型-表型關聯分析，以及臨床前治療測試。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。