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B16-F10-Luc
Tissue
Peau
Disease
Mélanome chez la souris

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B16-F10-Luc

Cell line · Product number 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

US$800.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée B16-F10-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine de mélanome B16-F10, initialement établie à partir d’un mélanome spontané survenu chez une souris C57BL/6. La lignée parentale B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer en raison de son fort potentiel métastatique et de sa greffe robuste et reproductible chez des hôtes syngéniques C57BL/6. Dans les cellules B16-F10-Luc, un gène de luciférase a été intégré de manière stable sous le contrôle d’un promoteur constitutivement actif (généralement EF-1α ou CMV) par transduction lentivirale, ce qui se traduit par une expression stable et à haut niveau de la luciférase au fil des passages.

Les cellules B16-F10-Luc émettent un signal bioluminescent en présence du substrat luciférine, ce qui permet une imagerie bioluminescente (IBL) in vivo quantitative et non invasive de la croissance tumorale, de la dissémination et des métastases chez des animaux vivants. Cette lignée convient aussi bien aux modèles sous-cutanés qu’intraveineux (métastases expérimentales) chez la souris C57BL/6, les colonies métastatiques se formant de préférence dans les poumons. Le rendement luminescent est linéairement proportionnel au nombre de cellules viables, ce qui permet un suivi longitudinal en temps réel de la charge tumorale sans qu’il soit nécessaire de sacrifier les animaux à chaque point de mesure. L’expression de la luciférase ne modifie pas de façon significative la cinétique de croissance in vitro ou in vivo des cellules B16-F10.

Parmi les principales applications, on peut citer l’évaluation d’agents antitumoraux, d’immunothérapies et de composés inhibiteurs de métastases dans des modèles syngéniques, ainsi que l’imagerie pharmacodynamique quantitative dans le cadre d’études oncologiques précliniques.

Tissue
Peau
Disease
Mélanome chez la souris

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Mélange de cellules fusiformes et de cellules de type épithélial

04Identifiers

Citation
B16-F10-Luc (numéro de catalogue Cytion 305658)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)
Products
Mélanine

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6