Skip to content
B16-F10-Luc
Tissue
Da
Disease
U nhọt da ở chuột

Documents

B16-F10-Luc

Cell line · Product number 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

B16-F10-Luc là một biến thể phát quang sinh học của dòng tế bào u hắc tố chuột B16-F10, vốn được thiết lập ban đầu từ một khối u hắc tố tự phát xuất hiện trên chuột C57BL/6. Dòng tế bào gốc B16-F10 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư nhờ khả năng di căn cao và khả năng cấy ghép mạnh mẽ, có thể tái tạo được trên vật chủ đồng gen C57BL/6. Trong các tế bào B16-F10-Luc, gen luciferase đã được tích hợp ổn định dưới sự điều khiển của một promoter hoạt động liên tục (thường là EF-1α hoặc CMV) thông qua quá trình chuyển gen bằng lentivirus, dẫn đến biểu hiện luciferase ở mức cao và ổn định qua các thế hệ tế bào.

Tế bào B16-F10-Luc phát ra tín hiệu sinh quang khi có sự hiện diện của chất nền luciferin, cho phép hình ảnh sinh quang (BLI) không xâm lấn, định lượng sự phát triển, lan rộng và di căn của khối u trong cơ thể động vật sống. Dòng tế bào này phù hợp cho cả mô hình tiêm dưới da và tiêm tĩnh mạch (di căn thực nghiệm) trên chuột C57BL/6, với các khối u di căn hình thành chủ yếu ở phổi. Đầu ra phát quang tỷ lệ tuyến tính với số lượng tế bào sống, cho phép theo dõi theo thời gian thực và liên tục khối lượng khối u mà không cần hiến tế động vật tại mỗi thời điểm. Sự biểu hiện luciferase không làm thay đổi đáng kể động học tăng trưởng in vitro hoặc in vivo của tế bào B16-F10.

Các ứng dụng chính bao gồm đánh giá các chất chống ung thư, liệu pháp miễn dịch và các hợp chất ức chế di căn trong các mô hình đồng gen, cũng như hình ảnh dược động học định lượng trong các nghiên cứu ung thư tiền lâm sàng.

Tissue
Da
Disease
U nhọt da ở chuột

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Hỗn hợp các tế bào hình thoi và tế bào biểu mô

04Identifiers

Citation
B16-F10-Luc (Mã sản phẩm Cytion 305658)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (đom đóm, được tối ưu hóa mã bộ ba)
Products
Melanin

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6