Skip to content
B16-F10-Luc
Tissue
ผิวหนัง
Disease
มะเร็งผิวหนังของหนู

Documents

B16-F10-Luc

Cell line · Product number 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

B16-F10-Luc เป็นอนุพันธ์ที่เรืองแสงได้ของเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาของหนู B16-F10 ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากมะเร็งเมลาโนมาที่เกิดขึ้นเองในหนู C57BL/6 สายพันธุ์ B16-F10 ต้นกำเนิดนี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็งเนื่องจากมีศักยภาพในการแพร่กระจายสูงและสามารถปลูกถ่ายในโฮสต์ C57BL/6 ที่มีความใกล้ชิดทางพันธุกรรมได้อย่างมีประสิทธิภาพและสม่ำเสมอ ในเซลล์ B16-F10-Luc ยีนลูซิเฟอเรสได้ถูกฝังอย่างคงที่ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ที่ทำงานอย่างต่อเนื่อง (โดยทั่วไปคือ EF-1α หรือ CMV) ผ่านการถ่ายโอนด้วยไวรัสเลนติไวรัส ส่งผลให้เกิดการแสดงออกของลูซิเฟอเรสในระดับสูงและคงที่ตลอดทุกช่วงของการเพาะเลี้ยง

เซลล์ B16-F10-Luc ปล่อยสัญญาณแสงชีวภาพเมื่อมีสารตั้งต้นลูซิเฟอริน ทำให้สามารถถ่ายภาพการเติบโต การแพร่กระจาย และการแพร่กระจายของเนื้องอกในสัตว์ที่มีชีวิตได้โดยไม่ต้องรุกราน (BLI) สายพันธุ์นี้เหมาะสำหรับทั้งแบบฉีดใต้ผิวหนังและแบบฉีดเข้าหลอดเลือดดำ (สำหรับการทดลองมะเร็งแพร่กระจาย) ในหนู C57BL/6 โดยกลุ่มเซลล์มะเร็งที่แพร่กระจายจะก่อตัวในปอดเป็นส่วนใหญ่ ผลการเรืองแสงมีความสัมพันธ์เชิงเส้นกับจำนวนเซลล์ที่มีชีวิต ทำให้สามารถติดตามภาระของเนื้องอกแบบเรียลไทม์และระยะยาวได้โดยไม่ต้องสังเวยสัตว์ทดลองในแต่ละช่วงเวลา การแสดงออกของลูซิเฟอเรสไม่เปลี่ยนแปลงพลวัตการเจริญเติบโตของเซลล์ B16-F10 ทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายอย่างมีนัยสำคัญ

การประยุกต์ใช้ที่สำคัญรวมถึงการประเมินสารต้านเนื้องอก, การบำบัดด้วยภูมิคุ้มกัน และสารยับยั้งการแพร่กระจายในแบบจำลองซิงจีเนียก รวมถึงการถ่ายภาพเภสัชพลศาสตร์เชิงปริมาณในการศึกษาทางมะเร็งวิทยาในระยะก่อนคลินิก

Tissue
ผิวหนัง
Disease
มะเร็งผิวหนังของหนู

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
การรวมกันของเซลล์รูปแกนและเซลล์คล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
B16-F10-Luc (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305658)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (ไฟลั๊ก, โคดอน-ออปติไมซ์)
Products
เมลานิน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6