B16-F10-Luc
Cell line · Product number 305658
B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
B16-F10-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים B16-F10 של מלנומה עכברית, אשר הוקם במקור ממלנומה ספונטנית שהתפתחה בעכבר C57BL/6. קו התאים ההורי B16-F10 נמצא בשימוש נרחב במחקר הסרטן בשל פוטנציאל הגרורתי הגבוה שלו וההשתלה החזקה והניתנת לשחזור במארחים סינגניים מסוג C57BL/6. בתאי B16-F10-Luc, גן לוקיפרז שולב באופן יציב תחת בקרתו של פרומוטור פעיל באופן קבוע (בדרך כלל EF-1α או CMV) באמצעות העברה לנטרו-ויראלית, מה שמביא לביטוי לוקיפרז יציב ברמה גבוהה לאורך מחזורי תרבית.
תאי B16-F10-Luc פולטים אות ביולומינסצנטי בנוכחות מצע לוקיפרין, מה שמאפשר הדמיה ביולומינסצנטית (BLI) כמותית ולא פולשנית של צמיחת הגידול, התפשטותו והגרורות בבעלי חיים חיים. הקו מתאים הן למודלים תת-עוריים והן למודלים תוך-ורידיים (גרורות ניסיוניות) בעכברי C57BL/6, כאשר מושבות גרורתיות נוצרות בעיקר בריאות. תפוקת הזוהר פרופורציונלית באופן ליניארי למספר התאים החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח בזמן אמת של עומס הגידול ללא צורך בהמתת בעלי חיים בכל נקודת זמן. ביטוי הלוציפרז אינו משנה באופן משמעותי את קינטיקת הצמיחה של תאי B16-F10 במבחנה או in vivo.
יישומים עיקריים כוללים הערכה של חומרים נוגדי-גידול, טיפולים אימונולוגיים ותרכובות מעכבות גרורות במודלים סינגניים, וכן הדמיה פרמקודינמית כמותית במחקרים אונקולוגיים פרה-קליניים.
- Tissue
- עור
- Disease
- מלנומה בעכבר
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- תערובת של תאים בצורת ציר ותאים דמויי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- B16-F10-Luc (מספר קטלוג Cytion 305658)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_C8XU
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
- Products
- מלנין
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
