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B16-F10-Luc
Tissue
Pele
Disease
Melanoma em camundongos

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B16-F10-Luc

Cell line · Product number 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

US$800.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

A B16-F10-Luc é um derivado bioluminescente da linhagem celular de melanoma murino B16-F10, que foi originalmente estabelecida a partir de um melanoma espontâneo surgido em um camundongo C57BL/6. A linhagem parental B16-F10 é amplamente utilizada na pesquisa sobre câncer devido ao seu alto potencial metastático e ao enxerto robusto e reproduzível em hospedeiros singênicos C57BL/6. Nas células B16-F10-Luc, um gene de luciferase foi integrado de forma estável sob o controle de um promotor constitutivamente ativo (geralmente EF-1α ou CMV) por meio de transdução lentiviral, resultando em expressão estável e de alto nível da luciferase ao longo das passagens.

As células B16-F10-Luc emitem um sinal bioluminescente na presença do substrato luciferina, permitindo a imagem bioluminescente (BLI) in vivo, não invasiva e quantitativa, do crescimento, disseminação e metástase tumoral em animais vivos. A linhagem é adequada tanto para modelos subcutâneos quanto intravenosos (metástase experimental) em camundongos C57BL/6, com colônias metastáticas se formando preferencialmente nos pulmões. A intensidade da luminescência é linearmente proporcional ao número de células viáveis, permitindo o monitoramento longitudinal em tempo real da carga tumoral sem a necessidade de sacrificar os animais a cada ponto temporal. A expressão da luciferase não altera significativamente a cinética de crescimento in vitro ou in vivo das células B16-F10.

As principais aplicações incluem a avaliação de agentes antitumorais, imunoterapias e compostos inibidores de metástase em modelos singênicos, bem como imagens farmacodinâmicas quantitativas em estudos pré-clínicos de oncologia.

Tissue
Pele
Disease
Melanoma em camundongos

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Mistura de células fusiformes e de tipo epitelial

04Identifiers

Citation
B16-F10-Luc (número de catálogo da Cytion 305658)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (firefly, com otimização de códons)
Products
Melanina

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6