B16-F10

A linhagem celular B16-F10 é uma sublinhagem da linhagem celular murina de melanoma B16, derivada de um tumor cutâneo espontâneo em um camundongo. Essas células são caracterizadas por seu potencial metastático agressivo, particularmente para os pulmões, o que as torna um modelo valioso para o estudo da progressão e da metástase do melanoma. As células B16-F10 apresentam alto teor de melanina, o que contribui para sua pigmentação e é utilizado como marcador em diversos ensaios para monitorar a proliferação celular e o crescimento tumoral. A linha B16-F10 foi obtida por meio de um procedimento seletivo realizado dez vezes, utilizando o método de Fidler, o que aumentou sua capacidade metastática em comparação com sua linha parental, a B16-F0, e com a sublinha B16-F1, que passou por um único procedimento seletivo.

As células B16-F10 são amplamente utilizadas na pesquisa do câncer devido à sua capacidade de formar tumores em camundongos C57BL/6 singênicos, proporcionando um modelo consistente e reproduzível para estudos in vivo. Essas células expressam vários antígenos associados ao melanoma, que são cruciais para investigar respostas imunológicas e desenvolver imunoterapias. Além disso, as células B16-F10 são utilizadas para avaliar a eficácia de agentes quimioterápicos e os mecanismos moleculares subjacentes à resistência aos medicamentos no melanoma. O perfil genético da linhagem celular e seu comportamento sob diferentes condições experimentais oferecem insights sobre as vias envolvidas na metástase do melanoma, auxiliando no desenvolvimento de estratégias terapêuticas direcionadas. Vale ressaltar que a derivada da B16-F10, a B16-BL6, exibe atividade invasiva ainda maior, tornando a série B16 um sistema-modelo abrangente para o estudo de diferentes aspectos da biologia e da terapia do melanoma.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.