Skip to content
B16-F10
Tissue
ผิวหนัง
Disease
มะเร็งผิวหนังของหนู
Synonyms
B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 melanoma F10

Documents

B16-F10

Cell line · Product number 305157

The B16-F10 cell line is a subline of the murine B16 melanoma cell line, derived from a spontaneous skin tumor in a mouse. These cells are characterized b...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ B16-F10 เป็นเซลล์ไลน์ย่อยของเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนัง B16 ของหนู ซึ่งได้มาจากเนื้องอกผิวหนังที่เกิดขึ้นเองในหนู เซลล์เหล่านี้มีลักษณะเด่นคือมีศักยภาพในการแพร่กระจายอย่างรวดเร็ว โดยเฉพาะไปยังปอด ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการลุกลามและการแพร่กระจายของมะเร็งผิวหนังเซลล์ B16-F10 แสดงปริมาณเมลานินสูง ซึ่งมีส่วนช่วยในการสร้างเม็ดสีและใช้เป็นตัวบ่งชี้ในการทดสอบต่างๆ เพื่อติดตามการเพิ่มจำนวนของเซลล์และการเติบโตของเนื้องอก เซลล์ B16-F10 ได้มาผ่านกระบวนการคัดเลือกสิบครั้งโดยใช้วิธีของ Fidler ซึ่งช่วยเพิ่มความสามารถในการแพร่กระจายของเซลล์เมื่อเทียบกับสายพันธุ์ต้นกำเนิด B16-F0 และสายพันธุ์ย่อย B16-F1 ที่ผ่านการคัดเลือกเพียงครั้งเดียว

เซลล์ B16-F10 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็งเนื่องจากความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนู C57BL/6 ที่มีพันธุกรรมเหมือนกัน ซึ่งให้แบบจำลองที่สม่ำเสมอและสามารถทำซ้ำได้สำหรับการศึกษาในสิ่งมีชีวิต เซลล์เหล่านี้แสดงแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งผิวหนังหลายชนิด ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันและการพัฒนาวิธีการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันนอกจากนี้ เซลล์ B16-F10 ยังถูกใช้ในการประเมินประสิทธิภาพของยาเคมีบำบัดและกลไกทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการดื้อยาในมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาโปรไฟล์ทางพันธุกรรมและพฤติกรรมของเซลล์ไลน์ภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่แตกต่างกันให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการแพร่กระจายของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา ซึ่งช่วยในการพัฒนากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่เป้าหมายเฉพาะ เป็นที่น่าสังเกตว่าอนุพันธ์ของ B16-F10 คือ B16-BL6 แสดงกิจกรรมการรุกล้ำที่มากขึ้น ทำให้ซีรีส์ B16 เป็นระบบแบบจำลองที่ครอบคลุมสำหรับการศึกษาแง่มุมต่างๆ ของชีววิทยาและการบำบัดมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา

Tissue
ผิวหนัง
Disease
มะเร็งผิวหนังของหนู
Synonyms
  • B16/F10
  • B16 F10
  • B16F10
  • B16 melanoma F10

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
การรวมกันของเซลล์รูปแกนและเซลล์คล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
B16-F10 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305157)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0159

05Expression and susceptibility

Products
เมลานิน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6