HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

קו התאים HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 הוא נגזרת מהונדסת גנטית של תאי HeLa Kyoto, הידועים בחוסנם ובשימוש הנרחב שלהם במחקר מדעי. קו תאים זה שונה באמצעות טכנולוגיית CRISPR-Cas9 כדי לבטא Nup358 מתויג mEGFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר מונומרי), מרכיב חיוני במכלול נקבוביות גרעיניות (NPC). Nup358, הידוע גם כ-RanBP2, ממלא תפקיד משמעותי בהובלה גרעינית-ציטופלזמית, בהרכבת ציר מיטוטי ובתהליכים תאיים אחרים. התג mEGFP מאפשר להציג את Nup358, מה שמקל על תצפית בזמן אמת על הדינמיקה והאינטראקציות שלו בתוך התא.

תאי HeLa Kyoto, תת-קו של תאי HeLa המקוריים, מאופיינים ביכולת הסתגלותם ובצמיחתם היציבה בתרבית. מערכת CRISPR-Cas9 בקו תאים זה מאפשרת עריכה גנומית מדויקת, ומבטיחה שתג mEGFP ישתלב במדויק בחלבון Nup358 מבלי לשבש את תפקודו. זה הופך את קו התאים HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 לכלי חשוב לחקר ההיבטים המבניים והתפקודיים של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות. חוקרים יכולים להשתמש בקו תאים זה כדי להשיג תובנות על המנגנונים השולטים בהובלה בין הגרעין לציטופלזמה ועל תפקידו של Nup358 בהומאוסטזיס התאי ובמצבי מחלה, כגון סרטן וזיהומים נגיפיים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו