HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

HK-CRISPR-mEGFP-Nup358细胞系是HeLa京都细胞的基因工程衍生物。该细胞系采用 CRISPR-Cas9 技术进行改造，以表达 mEGFP（单体增强型绿色荧光蛋白）标记的 Nup358，Nup358 是核孔复合体（NPC）的重要组成部分。Nup358 又称 RanBP2，在核胞质转运、有丝分裂纺锤体组装和其他细胞过程中发挥着重要作用。mEGFP 标签使 Nup358 可视化，便于实时观察其在细胞内的动态和相互作用。

HeLa Kyoto 细胞是原始 HeLa 细胞的一个亚系，具有适应性强、培养生长稳定的特点。该细胞系中的 CRISPR-Cas9 系统可实现精确的基因组编辑，确保 mEGFP 标记与 Nup358 蛋白准确融合，而不会破坏其功能。这使得HK-CRISPR-mEGFP-Nup358细胞系成为研究核孔复合体结构和功能的重要工具。研究人员可以利用这种细胞系深入了解核胞质转运机制以及 Nup358 在细胞稳态和疾病（如癌症和病毒感染）中的作用。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。