HK-CRISPR-mEGFP-Nup358

Dòng tế bào HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 là một biến thể được biến đổi gen từ dòng tế bào HeLa Kyoto, nổi tiếng với độ bền vững và được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu khoa học. Dòng tế bào này đã được sửa đổi bằng công nghệ CRISPR-Cas9 để biểu hiện Nup358 được gắn thẻ mEGFP (Protein Phát Quang Xanh Tăng Cường dạng đơn phân tử), một thành phần quan trọng của phức hợp lỗ nhân (NPC). Nup358, còn được gọi là RanBP2, đóng vai trò quan trọng trong vận chuyển nhân-chất lỏng, lắp ráp sợi phân bào và các quá trình tế bào khác. Thẻ mEGFP cho phép quan sát Nup358, giúp theo dõi động học và tương tác của nó trong tế bào theo thời gian thực.

Tế bào HeLa Kyoto, một dòng con của tế bào HeLa gốc, được đặc trưng bởi khả năng thích nghi và tăng trưởng ổn định trong môi trường nuôi cấy. Hệ thống CRISPR-Cas9 trong dòng tế bào này cho phép chỉnh sửa gen chính xác, đảm bảo nhãn mEGFP được gắn chính xác vào protein Nup358 mà không làm gián đoạn chức năng của nó. Điều này khiến dòng tế bào HK-CRISPR-mEGFP-Nup358 trở thành công cụ quý giá để nghiên cứu các khía cạnh cấu trúc và chức năng của phức hợp lỗ nhân. Các nhà nghiên cứu có thể sử dụng dòng tế bào này để hiểu rõ hơn về các cơ chế điều chỉnh vận chuyển nhân-chất tế bào và vai trò của Nup358 trong sự cân bằng nội môi tế bào và các trạng thái bệnh lý, như ung thư và nhiễm virus.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.