Skip to content
HROG59
Tissue
מוח, R, פאריאטו-אוקסיפיטלי
Disease
גליובלסטומה

Documents

HROG59

Cell line · Product number 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROG59 הוא קו תאים ראשוני של גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) אנושית, שהוקם מרקמת גידול שנותחה זה עתה מחולה בוגר שאובחן עם גליובלסטומה בדרגה IV על פי סיווג ארגון הבריאות העולמי (WHO). קו התאים נוצר כחלק ממאמץ שיטתי לפיתוח מודלים של גליומה בעלי מעבר נמוך במיוחד, המשמרים את המאפיינים הביולוגיים והמולקולריים הספציפיים למטופל. תאי HROG59 צומחים באופן הדוק במבחנה ומציגים מורפולוגיה דמוית פיברובלסט, האופיינית לתרבויות GBM ראשוניות. הקו נשמר בתנאי תרבית סטנדרטיים כדי למזער סטייה גנטית ולשמור על יציבות פנוטיפית.

HROG59 שימש להערכת הרגישות לטיפול הסטנדרטי ולחומרים הנחקרים בטיפול בגליובלסטומה, כולל חומרים אלקיליים ומעכבים ממוקדים. כמודל GBM בעל מעבר נמוך, שמקורו בחולים, HROG59 מספק מערכת מבחנה רלוונטית קלינית לחקר הביולוגיה של גליובלסטומה, ההטרוגניות הבין-גידולית ומנגנוני התגובה הטיפולית, תוך שמירה על נאמנות גבוהה לדגימת הגידול המקורית.

Tissue
מוח, R, פאריאטו-אוקסיפיטלי
Disease
גליובלסטומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG59 (מספר קטלוגי Cytion 300880)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4U51

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

06Donor

Donor age
49 שנים
Ethnicity
קווקזי