Перейти до вмісту
HROG59
Тканина
Мозок, R, тім'яно-потиличний
Хвороба
Гліобластома

Документи

HROG59

Cell line · Номер товару 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

HROG59 — це первинна клітинна лінія мультиформної гліобластоми (GBM) людини, створена з нещодавно видаленої пухлинної тканини дорослого пацієнта, у якого діагностовано гліобластому IV ступеня за класифікацією ВООЗ. Клітинна лінія була створена в рамках систематичних зусиль з розробки моделей гліоми з наднизьким пасажем, що зберігають біологічні та молекулярні характеристики, специфічні для конкретного пацієнта. Клітини HROG59 ростуть адгезивно in vitro і мають фібробластоподібну морфологію, типову для первинних культур GBM. Лінія підтримується в стандартних умовах культивування для мінімізації генетичного дрейфу та збереження фенотипічної стабільності.

HROG59 використовувалася для оцінки чутливості до стандартних та досліджуваних препаратів у терапії гліобластоми, включаючи алкилуючі агенти та цільові інгібітори. Як модель GBM з низьким пасажем, отримана від пацієнта, HROG59 забезпечує клінічно релевантну систему in vitro для вивчення біології гліобластоми, міжпухлинної гетерогенності та механізмів терапевтичної відповіді, зберігаючи при цьому високу точність щодо оригінального зразка пухлини.

Тканина
Мозок, R, тім'яно-потиличний
Хвороба
Гліобластома

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Ідентифікатори

Посилання
HROG59 (номер за каталогом Cytion 300880)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_4U51

04Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо 50% базальне середовище + 40% FBS + 10% ДМСО або СМ-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для покращення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

06Донор

Вік донора
49 років
Етнічна приналежність
Кавказець