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HROG59
Tecido
Cérebro, R, parieto-occipital
Doença
Glioblastoma

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HROG59

Cell line · Número do produto 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

€800.00sem impostos nem portes de envio
Feito por encomenda
1

01Informações gerais

Descrição

HROG59 é uma linha celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de um paciente adulto diagnosticado com glioblastoma grau IV da OMS. A linha celular foi gerada como parte de um esforço sistemático para desenvolver modelos de glioma de passagem ultrabaixa, preservando as características biológicas e moleculares específicas do paciente. As células HROG59 crescem de forma aderente in vitro e apresentam uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, típica das culturas primárias de GBM. A linha foi mantida em condições de cultura padronizadas para minimizar a deriva genética e manter a estabilidade fenotípica.

A HROG59 tem sido utilizada para avaliar a sensibilidade a agentes padrão de cuidados e investigacionais na terapia do glioblastoma, incluindo agentes alquilantes e inibidores direcionados. Como um modelo de GBM de baixa passagem derivado de pacientes, a HROG59 fornece um sistema in vitro clinicamente relevante para estudar a biologia do glioblastoma, a heterogeneidade intertumoral e os mecanismos de resposta terapêutica, mantendo uma fidelidade próxima à amostra tumoral original.

Tecido
Cérebro, R, parieto-occipital
Doença
Glioblastoma

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
HROG59 (número de catálogo Cytion 300880)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4U51

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
49 anos
Etnia
Caucasiano