HROG59
Cell line · Numer produktu 300880
HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...
Dostosowanie / Zalecenia
- HROG59Cell line€800.00
01Informacje ogólne
- Opis
HROG59 to pierwotna ludzka linia komórkowa glejaka wielopostaciowego (GBM) utworzona ze świeżo wyciętej tkanki nowotworowej dorosłego pacjenta, u którego zdiagnozowano glejaka IV stopnia według klasyfikacji WHO. Linia komórkowa została wyhodowana w ramach systematycznych działań mających na celu opracowanie modeli glejaka o bardzo niskiej liczbie pasażów, zachowujących specyficzne dla pacjenta cechy biologiczne i molekularne. Komórki HROG59 rosną przylegająco in vitro i wykazują morfologię podobną do fibroblastów, typową dla pierwotnych kultur GBM. Linia była utrzymywana w standardowych warunkach hodowli, aby zminimalizować dryf genetyczny i zachować stabilność fenotypową.
HROG59 została wykorzystana do oceny wrażliwości na standardowe i badane środki stosowane w terapii glejaka wielopostaciowego, w tym środki alkilujące i ukierunkowane inhibitory. Jako model GBM o niskiej liczbie pasażów, pochodzący od pacjenta, HROG59 stanowi klinicznie istotny system in vitro do badania biologii glejaka wielopostaciowego, heterogeniczności między nowotworami i mechanizmów odpowiedzi terapeutycznej, zachowując jednocześnie wysoką wierność w stosunku do oryginalnej próbki guza.
- Chusteczka
- Mózg, R, okolopotyliczny
- Choroba
- Glejak wielopostaciowy
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Identyfikatory
- Źródło
- HROG59 (numer katalogowy Cytion 300880)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4U51
04Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
06Darczyńca
- Wiek dawcy
- 49 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
07Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Obowiązują umowy z podmiotami zewnętrznymi
- Tak
.jpg)