Skip to content
HROG59
Tissue
สมอง, R, พาราอิเอโทอซิปิตอล
Disease
กลิโอบลาสโตมา

Documents

HROG59

Cell line · Product number 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

€800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HROG59 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมาหลายรูปแบบ (GBM) ในมนุษย์ที่แยกได้จากเนื้อเยื่อเนื้องอกที่เพิ่งผ่าตัดออกจากผู้ป่วยผู้ใหญ่ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งสมองระดับ WHO ชนิดที่ IV สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นเป็นส่วนหนึ่งของความพยายามอย่างเป็นระบบในการพัฒนาแบบจำลองเนื้องอกในสมองที่มีการผ่านผ่านต่ำมาก โดยยังคงลักษณะทางชีวภาพและโมเลกุลเฉพาะของผู้ป่วยไว้ เซลล์ HROG59 เติบโตแบบเกาะติดในหลอดทดลองและมีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของการเพาะเลี้ยงเซลล์ GBM ชนิดปฐมภูมิ สายพันธุ์นี้ได้รับการดูแลภายใต้เงื่อนไขการเพาะเลี้ยงมาตรฐานเพื่อลดการแปรผันทางพันธุกรรมและรักษาความคงที่ของลักษณะทางฟีโนไทป์

HROG59 ถูกนำมาใช้ในการประเมินความไวต่อมาตรฐานการรักษาและสารทดลองในการบำบัดโรคกลีโอบลาสโตมา รวมถึงสารอัลคิลเลติงและสารยับยั้งเป้าหมาย ในฐานะที่เป็นแบบจำลอง GBM ที่ได้จากผู้ป่วยที่มีการผ่านผ่านต่ำ HROG59 ให้ระบบ in vitro ที่มีความเกี่ยวข้องทางคลินิกสำหรับการศึกษาชีววิทยาของกลีโอบลาสโตมา ความหลากหลายระหว่างเนื้องอก และกลไกการตอบสนองต่อการรักษา ในขณะที่ยังคงความใกล้เคียงกับตัวอย่างเนื้องอกต้นฉบับ

Tissue
สมอง, R, พาราอิเอโทอซิปิตอล
Disease
กลิโอบลาสโตมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG59 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300880)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4U51

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Donor age
49 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน