HROG59
Cell line · Številka izdelka 300880
HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...
Prilagajanje / Priporočila
- HROG59Cell line€800.00
01Splošne informacije
- Opis
HROG59 je primarna človeška celična linija glioblastoma multiforme (GBM), vzpostavljena iz sveže odstranjenega tumorja odraslega pacienta, pri katerem je bila diagnosticirana glioblastoma stopnje IV po klasifikaciji WHO. Celična linija je bila ustvarjena v okviru sistematičnih prizadevanj za razvoj modelov glioma z izredno nizkim številom prehodov, ki ohranjajo biološke in molekularne značilnosti, specifične za posameznega pacienta. Celice HROG59 rastejo adhezivno in vitro in kažejo fibroblastno morfologijo, značilno za primarne kulture GBM. Linija se vzdržuje v standardiziranih kultiviranih pogojih, da se zmanjša genetski drift in ohrani fenotipska stabilnost.
HROG59 se je uporabljal za oceno občutljivosti na standardna in raziskovalna zdravila v terapiji glioblastoma, vključno z alkiliranimi sredstvi in ciljnimi zaviralci. Kot model GBM z nizkim številom prehodov, pridobljen iz pacienta, HROG59 zagotavlja klinično relevanten in vitro sistem za preučevanje biologije glioblastoma, heterogenosti med tumorji in mehanizmov terapevtskega odziva, hkrati pa ohranja visoko zvestobo originalnemu vzorcu tumorja.
- Tkivo
- Možgani, R, parietookcipitalni
- Bolezen
- Glioblastom
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Identifikatorji
- Navajanje vira
- HROG59 (Cytionova kataloška številka 300880)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4U51
04Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
06Donator
- Starost darovalca
- 49 let
- Etnična pripadnost
- Kavkaški
07Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Veljajo pogodbe s tretjimi strankami
- Da
.jpg)