Langsung ke isi
HROG59
Tisu
Otak, R, parietooccipital
Penyakit
Glioblastoma

HROG59

Cell line · Nomor produk 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

HROG59 adalah garis sel glioblastoma multiforme (GBM) manusia primer yang diisolasi dari jaringan tumor yang baru diangkat dari pasien dewasa yang didiagnosis menderita glioblastoma grade IV menurut klasifikasi WHO. Garis sel ini dikembangkan sebagai bagian dari upaya sistematis untuk menciptakan model glioma dengan jumlah passage ultra-rendah yang mempertahankan karakteristik biologis dan molekuler spesifik pasien. Sel HROG59 tumbuh secara adheren in vitro dan menunjukkan morfologi serupa fibroblas yang khas pada kultur GBM primer. Baris sel ini telah dipertahankan dalam kondisi kultur standar untuk meminimalkan drift genetik dan menjaga stabilitas fenotipik.

HROG59 telah digunakan untuk mengevaluasi sensitivitas terhadap agen standar perawatan dan agen investigasional dalam terapi glioblastoma, termasuk agen alkilasi dan inhibitor target. Sebagai model GBM dengan passage rendah yang berasal dari pasien, HROG59 menyediakan sistem in vitro yang relevan secara klinis untuk mempelajari biologi glioblastoma, heterogenitas antar tumor, dan mekanisme respons terapeutik, sambil mempertahankan kesetiaan yang tinggi terhadap spesimen tumor asli.

Tisu
Otak, R, parietooccipital
Penyakit
Glioblastoma

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Pengidentifikasi

Referensi
HROG59 (Nomor katalog Cytion 300880)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4U51

04Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan 50% media basal + 40% FBS + 10% DMSO, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

06Donatur

Usia donor
49 tahun
Etnis
Kaukasia