Gå direkte til indholdet
HROG59
Væv
Hjerne, R, parietooccipital
Sygdom
Glioblastom

Dokumenter

HROG59

Cell line · Varenummer 300880

HROG59 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with WHO gr...

€800.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HROG59 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje, der er etableret ud fra frisk resekteret tumorvæv fra en voksen patient diagnosticeret med WHO-grad IV glioblastoma. Cellelinjen blev genereret som led i en systematisk indsats for at udvikle gliomamodeller med ultralav passage, der bevarer patientspecifikke biologiske og molekylære egenskaber. HROG59-celler vokser vedhæftende in vitro og udviser en fibroblastlignende morfologi, der er typisk for primære GBM-kulturer. Linjen er blevet opretholdt under standardiserede dyrkningsbetingelser for at minimere genetisk drift og opretholde fænotypisk stabilitet.

HROG59 er blevet brugt til at evaluere følsomheden over for standardbehandling og forsøgsstoffer i glioblastomterapi, herunder alkylerende midler og målrettede hæmmere. Som en lavpassage, patientafledt GBM-model, giver HROG59 et klinisk relevant in vitro-system til at studere glioblastombiologi, intertumoral heterogenitet og terapeutiske responsmekanismer, samtidig med at den opretholder en tæt troskab til det oprindelige tumorprøve.

Væv
Hjerne, R, parietooccipital
Sygdom
Glioblastom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HROG59 (Cytion katalognummer 300880)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4U51

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Donorens alder
49 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk