Skip to content
MRC-9
Tissue
ריאות העובר
Synonyms
MRC9, Medical Research Council cell strain-9

Documents

MRC-9

Cell line · Product number 300394

The MRC-9 cell line is a human diploid fibroblast strain derived from the lungs of a White female fetus at 15 weeks gestation. It was established for long...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MRC-9 הוא זן פיברובלסטים דיפלואידי אנושי שמקורו בריאות של עובר נקבה לבנה בשבוע ה-15 להריון. הוא הוקם לשימוש ארוך טווח במחקר ביולוגי, בייצור חיסונים ובאבחון וירולוגי. התאים מפגינים תכונות צמיחה דבקות ושומרים על קריוטיפ דיפלואידי יציב לאורך כל תהליך ההתרבות הסדרתי. חשוב לציין שתאי MRC-9 בעלי מאפיינים כרומוזומליים תקינים ואינם גורמים לגידולים בתנאים רגילים. עם זאת, הם הפגינו תכונות גורמות לגידולים כאשר נבדקו במדיום חצי-מוצק, אך לא כאשר הושתלו בעכברים עם דיכוי חיסוני.

תאי MRC-9 שימשו רבות למחקרים על רגישות לווירוסים, והראו רגישות רחבה לווירוסים שונים כגון פוליו, אדנו, אדמת וציטומגלווירוס. תאים אלה בעלי ערך רב במיוחד לשימוש במחקר וירולוגי ובפיתוח חיסונים. למרות שקצב התרבותם איטי יותר בהשוואה לזנים אחרים של פיברובלסטים אנושיים, כגון MRC-5, תאי MRC-9 עדיין יכולים לעבור מספר משמעותי של הכפלות אוכלוסייה, עם דיווחים על עד 46 הכפלות.

Tissue
ריאות העובר
Synonyms
  • MRC9
  • Medical Research Council cell strain-9

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
פיברובלסט

04Identifiers

Citation
MRC-9 (מספר קטלוגי Cytion 300394)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2629

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
עובר