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MRC-9
ティッシュ
胎児肺
同義語
MRC9, Medical Research Council cell strain-9

MRC-9

Cell line · 製品番号 300394

The MRC-9 cell line is a human diploid fibroblast strain derived from the lungs of a White female fetus at 15 weeks gestation. It was established for long...

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01概要

説明

MRC-9細胞株は、妊娠15週目の白色女性胎児の肺に由来するヒト二倍体線維芽細胞株である。この細胞株は、生物学的研究、ワクチン製造、診断ウイルス学において長期的に使用するために樹立された。この細胞は接着増殖特性を示し、連続増殖を通して安定した二倍体の核型を維持する。重要なことは、MRC-9細胞は正常な染色体の特徴を持ち、典型的な条件下では非腫瘍原性であることである。しかし、半固形培地で試験した場合には腫瘍形成性を示したが、免疫抑制マウスに移植した場合には腫瘍形成性は示さなかった。

MRC-9細胞はウイルス感受性研究に広く用いられており、ポリオウイルス、アデノウイルス、風疹、サイトメガロウイルスなど様々なウイルスに対して幅広い感受性を示している。これらの細胞は、ウイルス学研究およびワクチン開発において特に貴重である。増殖速度はMRC-5のような他のヒト線維芽細胞株に比べて遅いものの、MRC-9細胞は依然としてかなりの数の集団倍加を行うことができ、最大46倍加という報告もある。

ティッシュ
胎児肺
同義語
  • MRC9
  • Medical Research Council cell strain-9

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

細胞の種類
線維芽細胞

04識別子

引用
MRC-9 (Cytion カタログ番号 300394)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_2629

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
胎児