Skip to content
MRC-9
Tissue
ปอดของทารกในครรภ์
Synonyms
MRC9, Medical Research Council cell strain-9

Documents

MRC-9

Cell line · Product number 300394

The MRC-9 cell line is a human diploid fibroblast strain derived from the lungs of a White female fetus at 15 weeks gestation. It was established for long...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ MRC-9 เป็นสายพันธุ์ไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์ที่ได้มาจากปอดของทารกเพศหญิงผิวขาวในระยะตั้งครรภ์ 15 สัปดาห์ สายพันธุ์นี้ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อใช้ในระยะยาวสำหรับการวิจัยทางชีววิทยา การผลิตวัคซีน และการวินิจฉัยทางไวรัสวิทยา เซลล์เหล่านี้มีลักษณะการเจริญเติบโตแบบเกาะติดและรักษาลักษณะโครโมโซมแบบไดพลอยด์ที่เสถียรตลอดการเพาะเลี้ยงต่อเนื่องที่สำคัญคือ เซลล์ MRC-9 มีลักษณะทางโครโมโซมปกติและไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในสภาวะปกติ อย่างไรก็ตาม เซลล์เหล่านี้ได้แสดงคุณสมบัติในการก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อทดสอบในสื่อกึ่งแข็ง แต่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อปลูกถ่ายในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกัน

เซลล์ MRC-9 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาความไวต่อไวรัส แสดงให้เห็นถึงความไวต่อไวรัสหลากหลายชนิด เช่น โปลิโอไวรัส อะดีโนไวรัส หัดเยอรมัน และไซโตเมกาโลไวรัส เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการวิจัยด้านไวรัสวิทยาและการพัฒนาวัคซีนแม้ว่าอัตราการเพิ่มจำนวนของเซลล์ MRC-9 จะช้ากว่าเมื่อเทียบกับสายพันธุ์ไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์อื่น ๆ เช่น MRC-5 แต่เซลล์ MRC-9 ยังคงสามารถเพิ่มจำนวนประชากรได้เป็นจำนวนมากอย่างมีนัยสำคัญ โดยมีรายงานว่าสามารถเพิ่มจำนวนได้ถึง 46 เท่า

Tissue
ปอดของทารกในครรภ์
Synonyms
  • MRC9
  • Medical Research Council cell strain-9

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
MRC-9 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300394)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2629

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ทารกในครรภ์