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MRC-9
Tecido
Pulmão fetal
Sinónimos
MRC9, Medical Research Council cell strain-9

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MRC-9

Cell line · Número do produto 300394

The MRC-9 cell line is a human diploid fibroblast strain derived from the lungs of a White female fetus at 15 weeks gestation. It was established for long...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular MRC-9 é uma estirpe de fibroblastos diplóides humanos derivada dos pulmões de um feto feminino branco com 15 semanas de gestação. Foi estabelecida para utilização a longo prazo em investigação biológica, produção de vacinas e virologia de diagnóstico. As células apresentam propriedades de crescimento aderente e mantêm um cariótipo estável e diploide ao longo da propagação em série. É importante salientar que as células MRC-9 possuem caraterísticas cromossómicas normais e não são tumorigénicas em condições normais. No entanto, demonstraram propriedades tumorigénicas quando testadas em meios semi-sólidos, mas não quando implantadas em ratinhos imunossuprimidos.

As células MRC-9 têm sido amplamente utilizadas para estudos de suscetibilidade viral, mostrando uma ampla suscetibilidade a vários vírus, como o poliovírus, o adenovírus, a rubéola e o citomegalovírus. Estas células são particularmente valiosas para a sua utilização na investigação virológica e no desenvolvimento de vacinas. Embora a sua taxa de proliferação seja mais lenta do que a de outras estirpes de fibroblastos humanos, como a MRC-5, as células MRC-9 podem ainda assim sofrer um número significativo de duplicações da população, tendo sido registadas até 46 duplicações.

Tecido
Pulmão fetal
Sinónimos
  • MRC9
  • Medical Research Council cell strain-9

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referência
MRC-9 (número de catálogo Cytion 300394)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2629

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Feto