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Células ACHN
Tissue
Rim
Disease
Adenocarcinoma

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Células ACHN

Cell line · Product number 300117

The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

A linhagem celular ACHN foi derivada do derrame pleural maligno de um homem caucasiano de 22 anos com adenocarcinoma renal amplamente metastático. A linhagem celular foi estabelecida em novembro de 1979, após a semeadura direta das células cancerosas em frascos de cultura contendo MEM de Eagle com 10% de FBS. Durante um período de 150 dias, as células foram mantidas e submetidas a passagens in vitro. Posteriormente, as células foram inoculadas por via subcutânea em camundongos nude, nos quais formaram tumores palpáveis e localmente invasivos em quatro semanas. Essa linhagem celular é tumorigênica, conforme evidenciado por sua capacidade de induzir tumores em 100% dos camundongos nude (5/5) inoculados com 10⁷ células, com os tumores se desenvolvendo em até 21 dias.

As células ACHN são caracterizadas por um padrão de crescimento aderente e expressam isoenzimas específicas, incluindo G6PD (tipo B). Essa linhagem celular também se destaca por sua resposta a interferons humanos e indutores de interferon, o que a torna particularmente útil para estudos antiproliferativos. Tanto as células ACHN originais quanto aquelas recuperadas de tumores em camundongos nude demonstram inibição de crescimento na presença de interferons humanos, destacando sua aplicação potencial em estudos que exploram a eficácia de terapias baseadas em interferon para o câncer renal.

A linhagem celular ACHN é uma ferramenta valiosa para a pesquisa do câncer, especialmente no contexto do adenocarcinoma renal. Ela serve como um importante modelo para o estudo da tumorigenicidade, do comportamento metastático e dos efeitos dos interferons na proliferação de células cancerosas. Sua capacidade de formar tumores in vivo e responder ao tratamento com interferon oferece uma plataforma robusta para o desenvolvimento e o teste de novas abordagens terapêuticas direcionadas ao carcinoma de células renais.

Tissue
Rim
Disease
Adenocarcinoma

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Sim, em camundongos nude
Doubling time
30 horas

04Identifiers

Citation
ACHN (número de catálogo da Cytion 300117)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CAIx- (anhidrasa carbônica Ix)
Protein expression
P53 positivo
Isoenzymes
CAIx-

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm² resultará em uma monocamada confluente em 4 dias.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
22 anos
Ethnicity
caucasiano